酶标仪单、双波长检测的比较
在用酶联免疫法测定抗原或抗体时，不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式，并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择，对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解，并且实际工作中也出现了使用单波长检测导致抗HCV部分弱阳性的漏检。因此，本人就酶标仪在选择单、双波长使用方面谈谈个人的体会，供同道参考。一 材料和方法
1.材料 由上海科华公司提供的乙肝表面抗原测定试剂盒；eppendorf 20-20ul的移液器。
2.仪器 上海科华公司的ST-360酶标仪和BIO-RAD 550酶标仪。
3.方法 底物液配制：底物液A、B各5ml混合，加入微量酶标记物，再加入5ml终止液，呈微黄色，混匀待用；利用上海科华公司提供的乙肝表面抗原试剂盒的酶标板，用94孔中准确加入150ul配制好的上述底物液，另2孔中加入150ul已终止的空白底物液作空白。在BIO-RAD 550酶标仪上分别进行450nm单波长和450nm及655nm（无630nm）的双波长检测，在ST-360上分别进行450nm单波长和450nm及630nm的双波长检测吸光度各两次。
二 结果
1.分别对所得结果进行统计，发现单、双波长测定结果有较大的差异，双波长测定结果的CV值远小于单波长测定，结果见表1。
2.对ST-360两次重复测定结果进行分析，结果基本一致，见表2。
表1 酶标板吸光度在两台酶标仪上的测定统计结果
酶标仪
BIO-RAD550
ST-360
波长
450nm
450nm+655nm
450nm
450nm+630nm
最小值
0.125
0.126
0.130
0.131
最大值
0.154
0.139
0.153
0.141
均值
0.1356
0.1329
0.1399
0.1361
标准差
0.00671
0.00267
0.00467
0.00247
CV（%）
4.94
2.01
3.34
1.82
最大值/最小值
1.232
1.103
1.177
1.076
表2 ST-360酶标仪两次吸光度测定统计结果
<P>波长
450mnm
450nm+630nm
1
2
1
2
最小值
0.130
0.129
0.131
0.131
最大值
0.153
0.152
0.141
0.141
均值
0.1399
0.1391
0.1361
0.13711
标准差
0.00467
0.00495 顶！！！！！！！！！
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