老三 发表于 2017-3-16 01:37:17

悬丝式血液流变仪在动物实验研究中的应用

张玲、卢贺起、岳广欣、汪文来
中国中医科学院中医基础理论研究所 (北京市东直门内南小街16号,邮编:100700)
摘要:
目前测定血液粘度的仪器种类不同,测定的数值变化较大,可能是由于受多种因素的影响, 尤其是实验条件和实验仪器的不同, 各测定单位的实验室应有针对性地完善本实验室的参考值,利于今后开展研究。本文介绍了悬丝式血液流变仪在动物实验研究中的应用情况,制定了本研究室测定部分动物的正常参考值范围。
关键词:血液流变学,全血粘度,血浆粘度,动物实验
血液流变学指标如全血粘度的测定已列入常规检查的范围, 但由于各种血液流变仪器, 存在着一些差异, 影响了临床实际应用 。我们使用的是悬丝式无摩擦式结构的血液流变仪, 开展了动物实验研究,积累了应用该仪器的一些数据,并建立两种动物血液粘度的本实验室参考值,在此给予介绍供同行参考。
材料与方法
1.实验动物
普通级成年大耳白家兔雌雄各3只、体重2~3.5kg;Wistar大鼠10只, 雄性, 体重200~250克,SD大鼠雌雄每组各3只,4组共24只、体重200~220克。全部动物皆饲在本所实验动物中心普通级和清洁级饲养室内,吃标准颗粒饲料,自由饮水。
2.全血粘度的测定
2.1 实验步骤:家兔由耳静脉取血,大鼠皆由心脏取血, 肝素抗凝血液, 全血2~3ml,测定全血粘度(0.8ml)后离心2000转/15min,制备血浆,测定血浆粘度。所有测定由专人负责。
2.2 仪器:由北京博莱特通科技有限公司提供,悬丝式血液流变测试仪。:
2.3测定样品数:家兔6只,分别在两个测定日取血,每只兔子分别在测定日取1份血样,每份血样测定3次,共36份数据;大鼠10只,每只大鼠于不同日子分别取血测定,每份血样测定3次,共30份数据。
2.4 数据处理:分别计算数据,应用Excell表和SP10.00统计软件进行分析,平均值±标准差(x±s),按公式计算变异系数CV%= s/X×100%,按1倍标准差计算参考值范围。
3.中药对血液粘度的影响研究
为结合数据分析,举例一项中药对大鼠血液粘度的试验研究事例,研究考证该仪器的测定性能。实验设四组动物,分为正常组、模型组、受试组一(SSZ-1)、受试组二(SSZ-1),每组6只动物。造模、给药等过程另文介绍,血液粘度测定步骤、方法同上。
结果
表1 :家兔的血液粘度值(x±s, n=36) (粘度单位mPa. s)
http://www.ivdchina.org/file/upload/201506/2009941503450.jpg

表1表明了本实验室通过悬丝式血液流变仪获得的家兔全血粘度和血浆粘度的参考值范围及重复性的方法学考证情况,其CV%计算值符合要求。
表2 :大鼠的血液粘度值(x±s, n=30) (粘度单位mPa. s)
http://www.ivdchina.org/file/upload/201506/2009941504120.jpg

表2表明了我实验室通过悬丝式血液流变仪获得的大鼠全血粘度和血浆粘度的参考值范围及重复性的方法学考证情况,同样其CV%计算数值符合要求。
表3 :中药对血瘀型大鼠血液粘度的影响(x±s, N=6) (粘度单位:mPa. s)
http://www.ivdchina.org/file/upload/201506/2009941504350.jpg

注:与正常组比较,*P<0. 05,**P<0. 01;与模型组比较,#P<0. 05, ##P<0. 01
通过数据分析可以清晰地看出在高切变率(100S-1、180S-1)下,没有观察出受试药物(SSZ-2)的药效作用(P>0. 05),而在低切变率(1S-1)下证明了受试药物(SSZ-2)的药效作用(P<0. 05)。
讨论
<P>1.随着现代化生活水品的提高,人们的心血管系统疾病发病率逐年升高,而测定血液的粘滞度是发现血液早期发生变化和观察诊断心血管系统疾病、糖尿病并发症的重要指标,而相关的中药研究已成为受关注的重点。因为当血脂、血糖、纤维蛋白原等生物大分子含量的增加可使血浆粘度增加,红细胞聚集性增强,红细胞变形能力下降,引起全血粘度进一步升高。血液粘度增高可增加血管壁切应力,加速动脉硬化;另外高粘滞血液的层流变化(轴流消失),使血小板、单核细胞易于在粥样硬化的血管内膜损伤处粘附、聚集和变形,导致血栓形成。在血管硬化和调节功能障碍时,血液粘度的轻度升高,即可使血流量明显降低。加之红细胞变形能力降低,更易引起微循环障碍和红细胞氧离度下降,容易引发糖尿病微血管病变甚至心脑缺血性病变的发成。所以此指标已成为临床的常规必备检查。但在检查中发现,在1、3、5

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