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Sequenom质谱法分析DNA甲基化

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发表于 2017-1-14 13:45:24 | 显示全部楼层 |阅读模式
原理:
亚硫酸氢盐处理目标DNA,把没有甲基化的C统统转化成U 用带P7启动子的PCR引物扩增目标片段 扩增的片段再通过P7启动子转录出RNA RNA用针对U碱基的特异裂解酶进行打断 打断后的片段用质谱进行检测 G碱基比A碱基重16个质量数 如果原来是甲基化的C,质谱中会检出G 如果原来是没有甲基化的C,质谱中会检出A 根据含G峰和含A峰的面积比较,可以推断出原来的样本中有多少是甲基化的,又有多少是没有甲基化的

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