【检验临床面对面】β

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【检验临床面对面】β

案例经过：这天，天气晴朗，冬日的阳光暖暖的，从窗外照到科室，如同铺了一层薄金。我们忙碌的工作着，带着一份好心情。快下班时同事很焦急的问我，为什么她用试纸条测试的血清β-HCG强阳性，她稀释过了，但是机器却做的小于0.5。还有一个标本试纸条筛查明显阳性，根据经验做的至少200，为何机器做的也是小于0.5？我问她质控怎样，她说很好。然后问她有没有做的β-HCG高的，她说有。这是怎么回事呢？

案例分析：HCG是在胎盘绒毛生成、分泌的，分子量是38000的糖蛋白激素，是推测胎盘机能的有效指标，结构上是α和β亚单位以非共价键结合存在。β-HCG浓度可以用于妊娠的诊断、治疗过程中的观察、绒毛性疾病的治疗管理及治疗效果的评价上。我们使用的是荧光磁微粒酶免法。该方法是使用两种特异性抗体的一步EIA夹心法。固定在磁性微球上的抗HCG-β单克隆抗体和碱性磷酸酶联标记的抗HCG-β单克隆抗体都是以冰冻干燥状态密封在试剂CUP中的。在该试剂CUP添加缓冲液和样品后，冰冻干燥的试剂开始溶解，抗原抗体反应随即发生。在一定温度下孵育一段时间后，用清洗液将游离的酶联标记抗体和样品成分除去（B-F分离）。之后，为了检测结合在磁性微球上的酶活性，添加酶底物，通过检测酶反应产生的荧光物质的生成速度确定血清或肝素血浆中的β-HCG浓度。

那个试纸条强阳性的标本，我首先想到的是“带现象”，建议她加大稀释倍数，由开始的30倍稀释转为60倍稀释，看看怎样，果然测得大于800，与临床和试纸条相符。至于那个阳性不强的，我建议她重检，结果做的结果208，与平时试纸条显色经验相符。同事不解，为什么呢？既然30倍做不出，那60倍更少了，应该更测不出啊？那两个标本挨在一起，会不会是交叉污染？我说我们的机器是用枪头加的，不是针加，污染基本可以排除。

那个强阳性的标本是因为“带现象”。抗原和抗体能发生特异性结合，产生可见的复合物。但是研究发现抗原抗体必须比例合适的时候，才能看见这个现象。如果抗体量远远大于抗原，就看不见复合物，称前带现象。如果抗原量远远大于抗体，也看不见复合物，称后带现象。显然，我们遇到的是后带现象。由于β-HCG浓度过高，使反应信号呈弱化，反应信号-剂量曲线呈钩状现象，所以测的值小于下限。当稀释倍数增大，样品没有那么高的β-HCG浓度，所以自然就测出来了。

可是，既然有钩状效应，为何试纸条可以检测出来？因为试纸条是定性的方法，包被的抗体量大，而机器是定量，包被的抗体量较少，方法也较为灵敏，所以更容易出现带现象。

至于那个208的标本，我推测是机器的偶然误差。可能机器枪头没有吸紧，或者吸到气泡，样品量加的不足引起。

心得体会：看似简单的问题，我们却不容易想到。因此，扎实的基础是关键，灵活运用更是必不可少。路漫漫其修远兮，吾将上下而求索。

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<div class="keytags">关键词：β-HCG钩状效应