【检验临床面对面】同一位病人，为什么两次测定结果差异如此之大？ ...

炎风

作者：太原市第八人民医院检验科  康婷芬

最近跟同事聊天，突然谈起去年的事，无限感慨。那时的我还是在免疫轮转，但有一件对我的印象深刻。

某天，门诊上午来了位病人，也就是例行体检之类的，其中要检查HBsAg定性。由于用的是血清检测，与喝水吃饭的关系不太大，抽血组再询问了没有进食油腻辛辣食物，就给病人抽血。

HBsAg是乙肝的感染指标之一，检测HBsAg常采用的酶联免疫吸附夹心法ELSIA以及胶体金层析法GICA。ELISA操作简单技术可靠，所以尽管检测HBsAg的新技术如PCR、化学发光法、电化学发光以及时间分辨逐一被建立跟应用，但ELSIA仍有应用价值，以ELSIA为主检测HBsAg。

ELSIA原理检测HBsAg是采用单克隆抗-HBs包被反应板，加入待测标本，同时加入多克隆抗-HBs-HRP,当标本中存在HBsAg时与包被抗-HBs结合，并与抗HBs-HRP结合成抗HBs-HBsAg-抗HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应。

我收到标本后也没有发现什么特异，跟平时一样离心后编号加样。最终结果，空白，阴性阳性对照以及室内质控OD值均正常，唯独此患者检测结果是阳性。我们用的都是全自动洗板机跟全自动酶标仪，这些环节应该是不会出问题的。然后我又用胶体金法测定了一次竟然是阴性，做到这步，有点怀疑自己的检测结果。但是胶体金有10%的阳性结果会漏检。还是对自己的结果有点质疑，于是又做了一遍还是依旧。对于这样的结果，我也不敢贸然发报告，想着跟患者沟通可以再抽个血检验一次。第二天，跟我们组前辈述说了一下自己遇到的这件事，他又测定了一次结果依旧。于是我们电话联系患者让改天再来检查，结果需要复查。

过了一天以后，患者又抽血化验，询问了病史用药情况等均无，但我们的检测结果出来真的吓了一跳，竟然是阴性，再次复查依旧是阴性。遇到这样的问题该怎么跟病人解释？自己作为专业人员该怎么解释呢？前辈也比较焦灼，最终拿着上次的阳性标本去了省级医院再次测定，依旧是阳性。跟老师们说一个病人相隔三天查结果，怎么会差异如此大呢？老师们提示说标本溶血有可能会引起假阳性，但是看着标本不大像溶血，他也不明其原因。

带着标本回来，我仔细观察了血样感觉仅有不易观察轻微的溶血。针对这样的问题我就翻阅资料，查看文献，HBsAg阳性的非溶血与溶血未发现两者有统计学差异，得出溶血对HBsAg没有影响。而有另一些研究则发现，溶血对HBsAg的检测有影响。做过类似的试验，同一位患者，如为溶血再次测定为阳性。得出当红细胞>25%时造成的溶血可导致假阳性。

最终我翻阅到如此一句话ELSIA法检测HBsAg对标本的要求是：空腹抽血、标本不能溶血。我们在实际的操作过程中标本溶血不影响测定结果，但遇到有些溶血标本量太少，测定HBsAg，吸血清时有微量红细胞的吸入，使得结果产生假阳性现象。我观察了手中的标本也只是轻微溶血，血标本血清量真的很少，终于找到了问题所在。

所以，红细胞能引起ELSIA法测定HBsAg假阳性结果。红细胞中的亚铁血红素具有类似过氧化物酶活性，其作用效应与辣根过氧化物酶类似，如果反应孔因非特异性吸附红细胞残留，加入TMB底物产生显色反应，造成假阳性结果。所以在采集血标本时。量不能太少，操作过程中血清浑浊一定要再吸样，避免红细胞混入造成的假阳性。

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<div class="keytags">关键词：HBsAg乙肝ELSIA