巧用血平板 99% 的人没见过

司徒凌楚

假作真时真亦假，真作假时假亦真。在检验科遇到的真与假不知凡几，每每深究必有所收获；当我们遇到一种罕见的发现时，该怎么处理呢？

现象的发现

在微生物工作期间，遇到了一个奇怪的现象。在一块血平板上培养的两种细菌（暂定为 X1 和 X2）中间，居然有「加强版」的溶血环（如下图所示）；但是，根据两种细菌菌落的形态特征，这绝不是熟知的 CAMP 现象。

「真相」究竟是什么？

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建模与验证

为了探究这种现象是偶然还是未知现象，我向组长申请了一块血平板，既要验证发现的现象，还要观察是否存在其它类似的现象，一板 8 点足够了；于是，我在血平板上参照 CAMP 实验的标准画了一幅山水画，美其名曰「两山夹一川」模型（如下图所示）。

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左侧为金黄色葡萄球菌标准菌株 ATCC25923，右侧为有β溶血的未知菌株（暂定 X1），中间从上往下依次为无乳链球菌、X1、X2、肺炎链球菌；温箱（35℃）培养 24 小时。

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这样，可以在一个平板上观察到 8 种不同的组合情况，有标准阳性对照的 CAMP 现象，有阴性对照，有验证上图现象的，也有探索未知的可能现象的部分。依据上图（顺序：左上至左下，右上至右下）可以观察到：

①金葡 ATCC25923 与无乳链球菌：CAMP 现象（标准阳性对照）；

②金葡 ATCC25923 与 X1：基本没有箭头状溶血，更像是 X1 自身产生的溶血环；

③金葡 ATCC25923 与 X2：有明显的箭头状溶血，类似 CAMP 现象；

④金葡 ATCC25923 与肺炎链球菌：无箭头状溶血；

⑤X1 与无乳链球菌：有明显的箭头状溶血，类似 CAMP 现象；

⑥X1 与 X1：基本没有箭头状溶血，更像是 X1 自身产生的溶血环；

⑦X1 与 X2：有明显的箭头状溶血，类似 CAMP 现象；

⑧X1 与肺炎链球菌：无箭头状溶血；

问菌是谁

虽然，我们观察到了许多类似现象，但是，这还不是最终的揭秘，还有 X1 与 X2 这两个未知菌。通过细菌图片染色，我们观察到 X1 与 X2 这两个未知菌均为革兰染色阳性的球菌（葡萄状）；幸好这两种菌当天都有做「细菌鉴定及药敏」，得知 X1 为金黄色葡萄球菌 MRSA 菌株、X2 为模仿葡萄球菌。于是，我们还顺便搜索了关于类似 CAMP 现象的文献，并未见上诉三种组合的相关报道。

总结与体会

CAMP 现象：又称 CAMP 试验，指 B 群链球菌能产生 CAMP 因子，可促进葡萄球菌的β- 溶血素溶解红细胞的作用，因此在两菌的交界处溶血力增加，出现箭头状或半月形的溶血区。

依据《全国临床检验操作规程》（第三版）的要求，必须选用金黄色葡萄球菌 ATCC25923 作为标准菌株，以验证待测菌株是否为 B 群链球菌；目前，主要用于无乳链球菌（属于 B 群）的检测。

类似 CAMP 现象：其实，自 CAMP 现象发现并被定义以来，先关学者又陆续发现了在金黄色葡萄球菌 ATCC25923 与产单核细胞李斯特菌、产单核细胞李斯特菌与马红球菌、金黄色葡萄球菌 ATCC25923 与枯草杆菌之间存在类似 CAMP 现象，这便说明，CAMP 现象并非金黄色葡萄球菌 ATCC25923 与 B 群链球菌所特有的现象。

本文使用了一块血平板，科学合理的设计「两山夹一川」模型，观察到了在金葡 ATCC25923 与模仿葡萄球菌、金黄色葡萄球菌 MRSA 菌株与无乳链球菌、金黄色葡萄球菌 MRSA 菌株与模仿葡萄球菌之间也存在类似 CAMP 现象。

目前，关于 CAMP 因子的本质尚无明确定论，碍于仪器设备限制，我们无法再对其进行更深层次的研究和探索，真相止于此而又不止于此。

其实，在「川」里，位于金黄色葡萄球菌 MRSA 菌株上方、下方的无乳链球菌与模仿葡萄球菌的「菌条」一侧也出现了溶血增加，而另一侧却没有溶血现象（大家仔细观察图片就知道了）；这也从另外一个角度说明了后两种类似 CAMP 现象的存在。

作者：位冒冒，河南省安阳市人民医院检验科

参考文献：
[1] 赵登贤.CAMP 试验应注意对金黄色葡萄球菌的选择 [J]. 医学检验与临床,2008,19(2):107.
[2] 郭志勤. 不能用加人血的血平板做 CAMP 试验 [J]. 临床检验杂志,2003,21(6).
[3] 杨梦, 洪秀华, 魏民, 倪语星. 金黄色葡萄球菌与枯草杆菌间的类似 CAMP 现象 [J]. 上海交通大学学报 (医学版),2000,20(2):189-190.
[4] 周强, 邓晨晖, 张文, 陈茶. 临床分离产单核李斯特菌血清型及耐药性检测 [J]. 现代检验医学杂志,2009,24(1).
[5] 吴健宁, 林润华, 林健. 孕妇泌尿生殖道 112 例无乳链球菌感染的耐药性分析 [J]. 医学研究杂志,2008,37(3):88-89.