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[微生物] 「军团菌病」一种现代城市文明病

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发表于 2017-3-16 00:50:11 | 显示全部楼层 |阅读模式
作者:福建省疾病预防控制中心  李曲文

1、军团菌病

军团菌病(Legionnaires’Disease) 是近30年来新发现的传染病之一,主要由嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)引起,以肺部感染伴全身多系统损伤为主要表现,也可表现为无肺炎的急性自限性流感样疾病,具有分布广、易造成流行和不易诊断的特点。随着人类文明的进步,人们的生活状态有了很大的改变,在生活质量提高的同时,一些鲜为人知的危险因子也随之而来,军团菌病就是一个很好的佐证。军团菌病的传播流行与使用中央空调、淋浴设施等有密切关系,军团菌病已成为一种现代城市文明不良“副产品”之一。

目前发现的军团菌有50多个种(species),70多个血清型(serogroups),大约有20个种可引起人感染。临床病例中分离的军团菌90%属于嗜肺军团菌。军团菌病在临床上一种是表现为军团菌肺炎,近年来军团菌感染的另一种模式的症状比典型的军团病要轻得多,仅见发热、咳嗽、头痛,极似流感,但病程短得多,仅5天便可自愈无死亡报导,称为庞地亚克热(Pontiac Fever)。这种感染模式多见于“办公室空调病”,极易与感冒混淆,其虽没有军团菌肺炎可怕,但对人的健康仍造成一定影响。

2、疑似军团菌病的实验室诊断

2.1 军团菌常规培养分离鉴定:军团菌为革兰氏阴性杆菌,专性需氧,胞内寄生菌军团菌生长需要L-半胱氨酸和三价铁离子,在BCYE及GVPC平板上培养3天长出细小菌落,培养7天长出棕褐色、圆形稍凸、湿润光滑菌落,菌落挑起有粘丝状,而在BCYE—cys及血平板上均不生长。染色镜检为革兰阴性短杆菌或呈细长头发丝状(如图1)。并做相应的血清及乳胶凝集试验,以鉴定军团菌的血清型别。(军团菌操作生物安全要求生物安全Ⅱ级实验室,在安全柜中操作)


「军团菌病」一种现代城市文明病

「军团菌病」一种现代城市文明病

图1镜下形态

「军团菌病」一种现代城市文明病

「军团菌病」一种现代城市文明病

图2 菌落形态


2.2 分子生物学诊断:

2.2.1  军团菌的属特异性基因:5SrRNA 基因检测军团菌属特异性, 可检测到104bp基因片段, 该序列较为保守,种间差异较小。16SrRNA是微生物核糖体RNA,在物种进化中保持相对的恒定的结构,具有种属的特异性,因此常作为物种鉴定的基因。鉴于军团菌基因组DNA 庞大的数字,  需要使用一些具有代表性的序列, 选择特异性较高的军团菌种属特异性序列就具有了重要的意义。16SrRNA和5SrRNA 可用来区分军团菌和非军团菌。

2.2.2 mip 基因:军团菌的嗜肺军团菌种特异基因,mip 基因编码巨噬细胞感染增强子蛋白,mip 基因有足够的序列差异来区别嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌。

2.2.3 疑似临床病例,同时也可以采取病人的肺泡灌洗液、痰液、胸水等提取细菌组DNA进行军团菌荧光PCR的快速诊断。

2.3 血清军团菌抗体及尿抗原检测:可用ELISA试剂盒检测疑似病例中血清军团菌抗体,军团菌感染l周左右可检测出血清中军团菌特异性IgM抗体,2周左右可检测到特异性IgG抗体。特异性血清抗体滴定〉1:256,或双份血清对比高4倍;放射免疫测定法或梅联免疫吸附试验测定尿中可溶性军团菌抗原,对军团菌病具有一定的诊断依据。

3、治疗

军团菌一种胞内兼生菌并可多伴产生β-内酰胺酶, 一般抗感染用的抗生素,治疗军团病常常被证明是无效的:它们仅能稍降高热而无法使之退至正常,只有红霉素、利福平等达到较高胞内浓度的脂溶性抗生素能成为本病克星。临床上对那些经多种抗生素治疗无效的重症肺炎应考虑军团病的可能。军团菌病的关键因素不在治疗而在确诊!然而确诊又因缺乏临床体征而困难重重,唯一有效的手段只能依靠实验室检查!军团菌人工培养的要求苛刻,时间漫长,显然不符合快速确诊的要求,血清学IgM类抗体检查以及基因水平的PCR技术、核酸探针技术则显示其良好的早期快速诊断前景,值得临床工作者的重视。


【本文系作者李曲文授权检验视界网发表,并经检验视界网编辑,转载请注明作者、出处和本文链接

<div class="keytags">关键词:军团菌病革兰氏阴性杆菌
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