北京清华长庚医院检验前质量控制之G实验检测篇

东方

案例：患者62岁，女性，以"寒战、发热伴喘憋2日，加重8小时"收住我院。患者因患有皮肌炎和类风湿性关节炎，长期口服糖皮质激素治疗。患者长期服用激素，免疫功能低下，不能排除真菌感染的可能性，医生在开立其他检查时也开了真菌培养以及G实验。收到患者标本后常规离心处理，血清用金山川微生物快速动态检测系统进行检测，结果显示质控在控，标本检测值>1000 pg/ml。

然而仔细镜检痰涂片，并未发现真菌孢子及菌丝，询问病史也并未找出食用蘑菇、服用香菇多糖、磺胺类药物等会影响G实验结果的因素。回顾分析该患者其他检测结果，发现APTT 100.4 ↑(危)，血小板17.00×10^9↓（危），哦，患者本身存在凝血功能异常。那么，G实验是真阳性还是受到了影响呢？为保证检验结果的准确性，不妨对整个检验过程进行重新检视。此时拿出检测样本发现“血清”凝固了。

大家知道G实验的原理是真菌细胞壁中的（1，3）-β-D葡聚糖可以激活鲎试剂中的G因子，继而活化凝固酶原，变成凝固蛋白，整个反应体系由清亮的液体状态变为凝胶状态，透光率也会随之降低，根据透光率的降低情况可得出（1，3）-β-D葡聚糖的含量。本例中因患者自身凝血功能异常，离心时凝血因子反应不充分，貌似得到了血清，其实还是含有凝固酶原成分的血浆。进行G实验检测时，部分凝固酶原尚未充分激活，肉眼观察为液体状态，在G实验进行中，“血清”中残留的凝血酶原持续活化，反应体系由清亮的液体变为了凝固状态，透光率急剧下降，得出检测结果>1000 pg/ml。但因为非触发了试剂中的G因子系统，而是标本本身的凝血系统受到激活，因此属于假阳性。将标本充分放置，待凝血因子系统充分反应后重新离心去除凝块后，重新进行G实验，检测结果为<10 pg/ml。

临床标本中，凝固过程变慢的标本非常多见，如血液病患者、透析患者、服用抗凝剂患者、经留置管采血混入抗凝剂者等。此种情况如不能及时发现，会导致发出错误报告，且往往都是在检验过程结束后发现检验值不对才会被发现。此案例提示：（1）标本前处理时，如果需要的是血清样本，则不用着急离心，应待凝血系统充分反应后再离心分离血清；（2）G试验结果阳性，尤其检测值异常高时，需要排除因为血液凝固延迟造成的假阳性。

G实验影响因素众多，尤其检验前标本的质量直接影响检测结果的准确性，常见的影响G实验结果的检验前因素总结如下：

1. 标本不合格，如未使用无菌无热源的专用采血管，血液受到污染；

2. 应用纤维素膜进行血液透析的患者；

3. 使用过含有葡聚糖的医疗用品，如某些纱布；

4. 白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等静脉制剂；

5. 某些细菌白血病患者（尤其是链球菌败血症）；

6. 抗肿瘤药物（香菇多糖、裂殖菌多糖）；

7. 磺胺类药物；

8. 蘑菇类食物；

9. 标本是否凝固了。