血培养检验方法的研究进展

炎风

       现代医学证明，由于近几十年以来各种广谱抗生素在临床的广泛应用，使得病原微生物的耐药性大大增强;同时也使得临床厌氧菌感染显著下降，霉菌感染上升。过去认为是非病原菌的凝固酶阴性葡萄球菌，现已证实其中12.4%是真正的菌血症病原菌，而过去认为是非病原菌的肺炎球菌以外的草绿色链球菌，现证明其中的轻型链球菌（Streptococcus mitis）是菌血症真正的病原菌。菌血症、败血症中特别是迁延型病人中的L型病原菌，占相当的比例。血培养方法是至今唯一能直接从血中检出病原菌和进行药敏试验的一项技术。现将血培养的是测定方法作一概述。

1 手工血培养瓶
       近30年来，西方国家陆续发展了几种各具特色的手工血培养瓶，并随着医院化验用品的商品化潮流而成为血培养检验的主角之一。
1.1 Speti-Chek血培养系统
       美国BD公司生产，是一种改进型的双相血培养瓶。其固体部分可同时包括麦康凯和巧克力琼脂块等，具有较好的效果。在和Signal手工瓶与ESP血培养仪的现场考核比较中，本瓶的污染率较低且检出率较Signal瓶高而与ESP血培养仪相近［1～4］ 。
1.2 Lsolator血培养管
       又称溶解离心系统，是Wampole实验室研制的一种有创意并效果良好的血培养方法。其构成为一个有塞的试管，内含皂苷（saponin）以溶解红细胞，聚丙烯甘油以除去泡沫，SPS作为抗凝剂，EDTA除去螯合钙离子;如此可抑制补体，经离心（3000g，30min）后弃上清，将含病菌的沉淀物用力振摇，然后划种在固体琼脂平板上，经培养后分离鉴定病原微生物。如此可省去许多培养时间和较易消除残留抗生素等抑菌因子，故不仅报告较快且检出率高，而且也能用于结核杆菌、军团菌等生长慢和难培养的菌。此法的缺点是操作较繁琐，污染率较高，和对某些菌如肺炎球菌、产单核李斯特菌、流感嗜血杆菌和厌氧菌等检出率低。这些已被许多现场结果所证实［1～3，5～7］ 。从总体上说此法仍不失为一个较优的方法。
1.3 Hemoline血培养系统
        是法国bioMerieux公司研制，包括一个双相需氧瓶和一个厌氧瓶，此系统效果很好 ［8］，能同时用于儿童和成人，在我国广大医院中应用较广 ［9］。
1.4 Signal血培养系统
       是英国Oxoid公司研制生产的一种有独特配方和设计的血培养瓶。可同时检查需氧菌和厌氧菌;瓶口上连接一可以显示产气的装置，一旦产气均表示血瓶内细菌已生长。但多次现场考核的结果，其检出率通常明显较其它血培养系统低［10～12］。
1.5 BACTCUL血培养系统
       近年在国内市场上见到美国Philastar公司生产的手工双相血培养瓶，但经试验其对细菌的生长能力并不理想。

2 全自动连续监测性血培养系统
       70年代以来西方国家已陆续研制和完善了多种自动化血培养仪，可连续（每10～15min1次）监测血瓶中细菌的生长。目前国内外常用的几种连续监测性血培养仪介绍如下。
2.1 BACTEC血培养仪
       美国BD公司从70年代初就开始研制和生产，已有多种型号的仪器。目前应用的主要是9000系列（9050，9120，9240等），其血培养仪主要有需氧和厌氧标准瓶，加有树脂的需氧和厌氧Plus瓶以及儿童瓶等。其树脂瓶经现场实验证明能较快地发现瓶中细菌并有较高的检出率。目前此系统在世界上特别在欧美应用较广［1～3，12～15］。
2.2 BacT/alert血培养仪 是荷兰Organon
       Teknika公司研制生产，依靠瓶底传感器测定瓶中pH的变化，来判别细菌的生长;除原有的需、厌氧血培养瓶外;近年研制的含有树脂和一种特殊活性碳的FAN需、厌氧血培养瓶;在加快检出时间和提高检出率方面也有突出的效果，目前也在世界上应用较广［16～20 。
2.3 ESP血培养仪
       美国Difco公司生产，有需氧和厌氧等血培养瓶。其现场考核效果虽略逊于前两个血培养仪，但也有一较好的全自动血培养系统［20，21］。
2.4 VITAL血培养仪
       法国bioMerieux公司于90年代中期研制生产，此仪器性能、血瓶质量和现场考核效果接近ESP系统，也是当前世界上主要的血培养仪之一［8，22］。
       综上所述，这种在血培养技术中革命性的变革，显著减轻了实验室的工作量，并可使血培养报告时间比手工瓶提前。虽然血培养仪有诸多优点，是今后的发展方向，但是进口血培养仪及相应的血培养瓶价格非常昂贵，目前国内仅部分大医院使用，且从国内情况看其对需氧菌的检出效果并不明显。近年来国外已证实BACTEC，Bact/Alert等市场较广使用的血培养仪仍存在某些漏检（主要是假单胞菌和白色念珠菌等专性需氧菌），且原因至今尚未完全查明［23～25］。近年来国内仅有个别人对研制手工瓶做了少量尝试［26］。但有了国产的血培养系统，并且在现场试验中，也取得了良好的验证效果。
参考文献
1 Forbes BA.Bailey&Scott’s Diagnostic Microbiology tinth ed.Mosby，1997，283-304.
2 Murray PR.Manual of Clinical Microbiology7th ed.AMS，Washington DC，1999，65-68.
3 Weinstein MP.Clin Infect Dis，1996，23（1）:40-46.
4 Welby PL，Keller DS，Storch GA.J Clin Microbiol，1995，33（5）:1084-1088.
5 KellyMT，Buck GE，Foitasek MF.J Clin Microbiol，1983，18（3）:554-557.
6 Engler HD，Fahle G，Gill VJ.Am J Clin Pathol，1996，105（6）:774-781.
7 Cockerill FR，Reed GS，Hughes JG，et al.J Clin Microbiol，1997，1469-1472.
8 Avril JL，Mathieu D，Saulnier C，et al.Ann Biol Clin，1999，53（1-2）:21-24.
9 张金艳，贾志英，代允普.对Hemoline双相手工血培养系统的评价.河北医药，1998，20（3）:175-176.
10 Murray PR，Niles AC，Heeren RL，et al.J Clin Microbiol，1998，26（12）:2526-2530.
11 Rohner P，Pepey B，Auckenthaler R.J Clin Microbiol，1995，33（2）:313-317.
12 Gray J，Brockwell M，Das I.J Clin Pathol，1998，51（4）:302-305.
13 Cokerill FR.J Clin Microbiol，1997，35（6）:1469-1472.
14 Yagupsky P.J Clin Microbiol，1997，35（6）:1382-1384.
15 杨柞升，颜向军，黄再平，等.BACTEC9050血培养仪的临床应用:附217份血培养结果分析.衡阳医学院学报，1999，27（2）:131-133.
16 Pohlman JH，Kirkley BA.J Clin Microbiol，1999，33（11）:2856-2858.
17 McDonald LC，Fune J，Gaido LB，et al.J Clin Microbiol，2000，34（9）:2180-2184.
18 Hellinger WC，Cawley JJ，Alvarez S，et al.J Clin Microbiol，2000，34（10）:2544-2547.
19 Ziegler R，Johnscher I，Martus P，et al.J Clin Microbiol，2001，36（3）:657-661.
20 Doern GV，Barton A，Rao，S.J Clin Microbiol，2001，36（9）:2686-2689.
21 Welby-sellenriek PL，Keller DS，Ferrett RJ，et al.Clin Microbiol，1999，35（5）:1166-1171.
22 Zaidi AK.J Clin Microbiol，2000，35（8）:2007-2012.
23 Shigei JT，Shimabukuro JA，Pezzlo MT.J Clin Microbiol1998，33（5）:1385-1388.
24 Lelievre H，Gimenez M，Vandenesch F，et al.Eur J Clin Microbiol Inˉfect Dis，1999，16.
25 Klacrner HG，Eschenbach U，Kamcrcck K，et al.J Clin Microbiol，2000，38（3）:1036-1041.
26 刘丁，张文俊，陈萍，等.双相血培养瓶的制备和应用评价.重庆医学，1999，28（2）:126-127.
                                                                                                山东省淄博市桓台县果里医院检验科

hosstd

学习学习一下