厌氧菌培养的注意事项

姑姑机

       近十年来已了解到，无芽胞厌氧杆菌及球菌是细菌性感染中重要原因之一，大部分是混合感染与兼性厌氧菌同时存在，厌氧菌感染是一种内源性感染，病种遍及临床各科、人体的各个部位，各种器官的感染均可发生厌氧菌感染，因此开展厌氧细菌检验对感染性疾病的诊断和治疗有十分重要的临床价值。
什么是厌氧菌？
       在无氧（或少氧）条件下，或氧化还原电势低的条件下才能繁殖的细菌称为厌氧菌。因为厌氧菌在人体肠道、口腔、泌尿生殖道正常菌群中占优势，所以当人体菌群失调时，厌氧菌可能侵犯人体许多部位，发生严重的甚至致死的内源性厌氧菌感染。厌氧菌感染常发生在深部伤口, 但也可伴兼性厌氧菌和需氧菌侵犯人体任何器官和组织，所以，对厌氧菌检验应给予高度重视。
人体各部位厌氧正常菌群：
皮肤：少丙酸杆菌属、革兰阳性厌氧球菌；
上呼吸道 ：放线菌属、真杆菌属、丙酸杆菌属、类杆菌属、梭形杆菌属、革兰阳性及阴性厌氧球菌；
口腔：类杆菌属、梭杆菌属、厌氧球菌、革兰阳性无芽胞厌氧杆菌、放线菌属；
肠道：梭形芽胞杆菌、无芽胞G+杆菌、类杆菌、梭形菌属、厌氧球菌；
外生殖器：厌氧球菌、G-厌氧杆菌 (类杆菌)；
阴道：类杆菌属、厌氧性球菌、双歧杆菌属、乳酸杆菌属；
尿道：类杆菌属、梭形杆菌属、厌氧球菌。
人体各部位厌氧菌感染机率：
菌血症：10～15%
中枢神经（脑脓肿）：10～90%
副鼻窦炎：30～50%   
中耳炎：56%
化脓咽颊炎：50%
颈部感染：100%
口腔感染：100%
咬伤：50%      
胸部感染：60～100%                  
腹部感染：100%      
胆道感染：40%   
肝脓疡：50%
妇科感染:70～90%
皮肤软组织感染：60～100%
最佳条件下各类厌氧菌分离比率：

可疑厌氧菌感染特征：
感染局部产生气体；
分泌物有恶臭、带血或呈黑色；
粘膜周围的感染，如肛周、口腔、鼻窦、咽颊等；
细菌培养阴性，但有菌血症表现；
长期使用氨基糖苷类抗生素，但无效者；
有基础疾病免疫低下者。
下列细菌学指征有助于选择标本做厌氧培养：
（1）深部伤口或软组织脓肿的脓，特别是伴有恶臭或含有硫磺颗粒时。
（2）可疑为气性坏疽或少见的严重产气或坏死性感染所取得的坏死组织或病灶清除材料。
（3）粘膜部位的感染灶取得的材料。
（4）从脑、肺、肝或其他器官的脓肿或从腹腔内、肛周、隔下或其他部位的脓肿取得的材料。
（5）无菌区感染灶的吸出液(包括血液、脑脊液、腹水、胸水、滑膜液、羊水等)。
（6）人或动物咬伤感染灶取得的材料。
（7）变黑的或置于紫外线发红色荧光的渗出物。
（8）革兰染色，镜下见到具有厌氧菌独特形态的材料。
（9）可疑引起肉毒杆菌食物中毒的食物。
       厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此下列材料无需做厌氧培养：
（1）咽、鼻、尿道或直肠拭子。
（2）咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物，排出或导出的尿、粪及胃内容物。
为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染，用注射器抽取标本比用拭子更好，特别适用于下列临床情况：
（1）从未开放的脓肿抽取脓液。
（2）通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。
（3）从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集的尿。
（4）气管切开吸取的肺分泌物。
（5）女性生殖器：后穹隆穿刺。
（6）通过腰椎穿刺抽出的脑脊液。
（7）窦道标本可插入小导管用注射器吸出，注射器和针头内的气体应全部排出，将其内容物直接注入一个已排出气的无菌试管内。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。如果必须使用拭子，应尽快接种于适宜的培养基中。
正确地运送标本:
       临床标本一旦离开人体部位，在进入厌氧环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或管，在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素，因它会抑制细菌生长。
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