EB病毒血清学Liaison全自动检测

岚峰pisces

EB病毒是Epstein和Barr于1964年首次成功地从Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株，并用电镜在建株细胞涂片中观察到疱疹病毒颗粒。它主要感染人类口咽部的上皮细胞和B淋巴细胞，EB病毒长期潜伏在淋巴细胞内，以环状DNA形式游离在胞浆中，并整合于染色体内。EB病毒在人群中广泛感染，幼儿感染后可出现发热，或引起轻症咽炎和上呼吸道感染。青年期发生原发感染，约有50%出现传染性单核细胞增多症，三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大。EB病毒主要通过唾液传播，也可经输血传染。EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染B淋巴细胞，这些细胞大量进入血液循环而造成全身性感染。并可长期潜伏在人体淋巴组织中，当机体免疫功能低下时，潜伏的EB病毒活化形成复发感染。由于EBV感染后不具有典型临床表现，且多样复杂，也有感染严重临床疾病的可能，故EBV血清学检查的重要性在于：排除EBV急性感染，尤其是对不明原因的发热患者发热原因的鉴别。
      EB病毒的形态与其他疱疹病毒相似，圆形、直径180nm，基本结构含核样物、衣壳和囊膜三部分。EB病毒仅能在B淋巴细胞中增殖，可使其转化，能长期传代。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生各种抗原，已确定的有：EBV核抗原（EBNA），早期抗原（EA），衣壳抗原（VCA），膜抗原（MA），淋巴细胞识别膜抗原（LYDMA）。而临床上最为熟悉且得到广泛使用的是针对前三种抗原所对应的相应IgG或IgM抗体检测：即VCA IgM，VCA IgG，EBNA IgG和EA IgG，索灵Diasorin公司的全自动检测平台Liaison开发出的针对此四个项目的检测，由于其良好的特异性和灵敏度表现在全球广泛客户中得到肯定。在和血清学检测的金标准western blot方法做对比的试验中，索灵公司的Liaison全自动检测平台上的相应血清学检测项目都有极好的表现（如图一），其中多项的阴性和阳性符合率都达到100%；EBV VCA IgM阳性符合率在92.3%，VCA IgG阴性符合率在96.0%，但依然位列前位。

        图一、索灵公司EB血清学检测项目与western blot的比较
      EB病毒VCA在裂解增殖时期表达，与病毒复制有关。IgM感染开始阶段一过性表达，3个月后消失。IgG在感染开始阶段或者紧随IgM后表达，之后VCA IgG持续终生。有些人（儿童）初次感染不产生VCA IgM，同时有些患者VCA IgM可能持续表达时间较长，甚至到EBNA-1 IgG表达。EBV核抗原（EBNA）是维持隐形感染的蛋白，在增殖期表达停止，其抗体在初次急性感染阶段没有表达，EBNA IgG抗体提示既往感染的明确指标，但依然有EBNA-1感染后几个月或多年都不表达的个体：EBNA-1无应答者或被免疫抑制患者。早期抗原（EA）亦在裂解增殖时期表达，与病毒复制有关。80%的患者在感染早期表达抗-EA IgM抗体，之后消失。在抗-EA IgG达峰值后几周，在恢复期消失，需要注意的是仍有20-30%的患者会呈低水平表达。无疑熟悉相应抗体经典表达模式（如图二）对临床诊断非常重要。综合以上的VCA IgM/IgG，EBNA IgG和EA IgG的表达模式，易感状态：检测不到病毒VCA抗原。初次感染：出现VCA IgM，无EBNAIgG。若出现VCA IgG水平增加或高浓度，同时发病后四周无EBNA则初次感染的可能性大。80%的EBV活动期时可检测到EA抗原。既往感染：出现VCA IgG和EBNA IgG，则提示4、6周之前的感染。绝大多数成人（95%）感染过EBV。由于EBV感染后抗体可持续多年高水平或者增高，因此不能以此作为近期感染的指标。复发可出现EBNA抗体，EA抗体水平增加提示复发。仅以EA抗体不能判断患者目前的状况就是由EBV引起，由于许多无症状健康人多年前感染过EBV后也会持续多年表达EA抗体。

        图二、EB感染病程过程中血清学四项变化
      另外EB病毒被认为可能是多种恶性肿瘤（如鼻咽癌，Burkitt淋巴瘤等）的病因之一。中国南方（广东，广西）及东南亚是鼻咽癌高发区，且多发生于40岁以上中老年人。鼻咽癌患病人群中检测到EB病毒基因组存在。EBV与鼻咽癌关系密切，表现（1）在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在和表达（2）病人血清中有高效价EBV抗原（如早期抗原EA）的lgG和lgA抗体。鼻咽癌患者EBNA、MA、VCA、EA均产生相应的lgG和IgA抗体，研究这些抗原及其抗体，对阐明EBV与鼻咽癌关系及早期诊断对临床均有重要意义。2011年5月6日，钟南山院士在广州市医学院附属第一医院召开新闻发布会，公布了针对60名“阴滋病患者”的研究结果，60名“患者”中，其中33人检出EB病毒，这也提示了EB病毒对人类的可能潜在威胁。
      以上EB病毒对人类造成的各种威胁无疑需要引起我们的重视，临床对EB感染重视，并加强跟踪和加深了解也为患者带来了福音。
                                                                                               摘自定向点金《临床实验室》杂志2012年第十期
                                                                                                                      编辑：范伟伟