头孢哌酮

新佐罗

探讨使用头孢哌酮-舒巴坦钠不同药量配比药敏纸片对药敏结果的影响。方法  用参考方法琼脂稀释法作为对照方法，检测头孢哌酮钠、头孢哌酮-舒巴坦钠(2:1)和(1:1)配比与头孢哌酮钠、头孢哌酮-舒巴坦钠75/30微克和75/75微克药敏纸片对临床分离534株革兰阴性菌的MIC与抑菌环直径的相关性，以及两种药量配比药物检测MIC之间、两种药量配比检测抑菌环直径之间是否有统计学差异。 结果 两种药量配比药物稀释法MIC结果无统计学差异；75/30微克药敏纸片检测的敏感率、耐药率和中介率与稀释法结果相似，而75/75微克比75/30微克药敏纸片检测的总敏感率高17.2%，耐药率低12.1%（约低1倍），中介率低5.1%；经对两种药量配比药敏纸片检测所有菌株的抑菌环直径进行配对t检验，p<0.05，但只引起产ESBLase菌株、鲍曼不动杆菌和其他肠杆菌科菌株（除外常规检测ESBLase阴性菌）敏感率和耐药率有统计学差异；而对铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和ESBLase阴性菌株的敏感率或耐药率未造成统计学差异。 结论 头孢哌酮-舒巴坦钠(2:1)和（1:1)药量配比稀释法药敏结果及75/30微克纸片法药敏结果或耐药监测结果可通用。若使用75/75微克药敏纸片报告产ESBLase菌株、鲍曼不动杆菌和其他肠杆菌科菌株的药敏性结果，或计算其敏感率或耐药率，则应注明药敏纸片的药量配比。近年来，由于超广谱β-内酰胺酶产生，使得很多临床分离菌株对三代、四代头孢菌素耐药不断增加［1，2］，使用β-内酰胺类酶抑制剂的复方药物在临床应用逐渐增多，头孢哌酮钠/舒巴坦钠是常用药物之一［3］，目前，临床治疗使用较多的有头孢哌酮-舒巴坦钠2:1（2000/1000 mg/瓶, 1000/500mg/瓶）和1:1（500/500 mg/瓶，750/750 mg/瓶）两种药量配比药物［4］，药敏试验使用的头孢哌酮-舒巴坦钠有75/30微克和75/75微克两种药量配比药敏纸片法以及MIC方法，实验室报告结果使用的药量配比可能和临床治疗用药量配比不同。本文旨在探讨两种药量配比的不同实验方法检测结果对体外药物敏感性报告的影响。
材 料 与 方 法
一、材料
1、菌种来源：收集2005年至2008年4月北京地区临床不同来源（血液、痰、尿及体液）标本分离菌株共534株，其中产ESBLase大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌173株，不产ESBLase81株；其他肠杆菌科细菌5个属共60株，包括肠杆菌属21株，费劳地枸橼酸杆菌8株，摩根摩根菌6株，粘质沙雷菌11株，产酸克雷伯菌14株；非发酵菌220株，包括鲍曼不动杆菌88株，铜绿假单胞菌69株，嗜麦芽窄食单胞菌63株。本次研究用菌株经VITEK或API鉴定，鉴定率均大于90%。
2、药物标准品：头孢哌酮钠(cefoperazone Sodium, CPZ）, 批号：08356018，生物活性相当于931μg/mg纯品；舒巴坦钠(Sulbactam Sodium, SBT）, 批号：08391030，生物活性相当于90.3%纯品；均来自美国Pfizer药厂，试验期间，所有标准品均在有效期内。
3、药敏纸片：头孢哌酮钠(75μg/片)，批号：550094，头孢哌酮-舒巴坦钠(75/30微克/片), 批号：658301 头孢哌酮-舒巴坦钠(75/75微克/片) ，批号：560248, 均来自英国Oxoid公司。试验期间，所有药敏纸片均在有效期内。
4、培养基：MH肉汤来自英国Oxoid公司，MH琼脂来自法国bioMerieux公司。
5、仪器：多点接种仪（英国Boekel Scientific公司）
二、方法
1、药敏试验参考方法：采用琼脂稀释法检测所有菌株最低抑菌浓度（MIC），依据美国临床和实验室标准化研究院（CLSI）需氧菌琼脂稀释法药敏方法 (M7-A7, 2006)［6］；
2、纸片扩散法药敏试验：采用纸片扩散法（K-B法）检测所有菌株抑菌环直径，依据 CLSI需氧菌纸片扩散法药敏方法 (M2-A9, 2006) 标准［7］；两种方法药敏结果解释包括质控结果依据CLSI (M100-S18, 2008) 标准［8］。
3、统计学分析：统计软件使用SPSS16.0，统计方法包括:比较两种药量配比药物MIC用Wilcoxon 符号秩和检验；比较两种药量配比药物KB法抑菌环直径差异用配对样本t检验（双尾）；拟合方程使用逐步线性回归法；曲线拟合采用线性模型。
结  果
一、试验数据
1、质控结果依据CLSI琼脂稀释法药敏标准M7-A7检测MIC，接种每种药物的成套系列浓度平板均包括相应质控菌株，纸片法药敏标准M2-A9检测抑菌环直径，每批试验菌株带相应质控菌株，质控结果范围见表1 。参照Arthur［5］文献, 虽然不同配比头孢哌酮-舒巴坦没有标准菌株质控范围，因舒巴坦是酶抑制剂，对不产酶标准菌株大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853没有抑菌作用，故这两种标准菌株对头孢哌酮-舒巴坦的两种药量配比药物的质控范围，采用头孢哌酮的质控范围。全部质控结果在CLSI标准M100-S18可接受质控范围内［8］。