ACCESS化学发光分析仪在机样品风干速度及其对测定结果的影响 ...

我心依旧

滕龙　杜成仁　温怀凯
　　Access 化学发光分析仪具快速、简便等优点。在实际工作中,我们发现该仪器上机血清蒸发速度过快,致检测结果误差较大;并进行了试验研究。
一、材料和方法
1. 主要仪器与试剂: Access 化学发光分析仪( 编号403602) 和配套试剂(美国贝克曼库尔特公司) ,700 样品杯(浙江黄岩拱东化学塑料实验厂) ,混合血清、蒸馏水等本室自备,METTLER AE240 电子分析天平(香港悦泰洋行) 。
2. 蒸馏水蒸发试验:60 个样品杯各加117 ml 蒸馏水,用分析天平准确称量,上机过夜后取出称样品杯重量,并记录。
3. 模拟样品测定:60 个样品杯各加200μl 混合血清经分析天平称量上机,在第一架的1、2 杯分别加TT4、SF ,开机5 min 后停机;在第一架的3、4 杯分别加TT4、SF ,每间隔5 min停机;在单号杯中加入TT4 ,双号杯中加入SF ,至第60 杯止。待稀释结束,取出60 个样品杯称量,记录结果。分别吸取SF
定标液各200μl 定标后,将剩余的2～5 定标液作为样品进行测定。
二、结果
1. 蒸馏水蒸发水平: 在室温20 ℃,湿度24 %条件下,60 个盛满蒸馏水的样品杯上机1515 h 后取出。60 个样品杯中剩余蒸馏水相差很大,有6 杯蒸馏水几乎干枯;经称量减少范围为33916～1 67013 mg ,风干速度相差4192 倍,以蒸馏水密度110 计算, 平均每管减少4512 μl/ h , 最多减少10718μl/ h。减少最多的是1 号架10 号杯,并以此为中心,呈两边逐渐减少分布,第3 架4 号杯减少量最少。而1 ,5 ,6 号架4 号杯与2、3、4 号架6 号杯,并未按同架顺序依次减少。
2 . 混合血清样品杯蒸发水平:从上机到样品稀释结束共215h ,取出经称量60个样品蒸发为8012 ±211mg ,每个样品平均蒸发速度3 2 1 1mg / h 。混合血清原SF浓度17812μg/ L ,30 个样品上机不同时间测定结果22016 ±1619μg/ L。测定结果升高值c (μg/ L) 与完成延长时间t (min)的关系经回归分析,c = 1016 + 01371 t , r = 01845 5。TT4 原浓度为8012 nmol/ L ,30 个样品上机不同时间测定结果为9816±817 nmol/ L ,测定结果升高值c (nmol/ L) 与完成延长时间t (min) 的关系经回归分析,c = 01246 + 01230 t , r = 01940 6。
3. 4 种SF 定标液定标与测定相差98 min ,测定结果显示,定标液浓度均升高50 %。
三、讨论
1. 风干过大及孔间差异的原因: 60 个蒸馏水杯上机1515 h ,减少范围33916～1 67013 mg ,杯间相差4192 倍。其原因由仪器冷藏装置的排风口对准1 ,6 标本架的位置所致,而1 ,5 ,6 号架4 号杯与2 ,3 ,4 号架6 号杯并未按同架的顺序依次减少,这与样品架手提把挡住风的流向有关。
2. 风干现象对实际样品测定结果的影响: (1) 混合血清上机滞留时间与测定结果升高值呈正相关,与上机后样品未稀释前被风干浓缩有关。此外,4 种SF 定标液测定结果差异较大,这可能与吸样完毕的样品杯正好停留在排风口有关。(2) 60 杯混合样品的平均减少量少于蒸馏水的蒸发量,这与血清成分(含蛋白质、电解质等) 有关。另外,不同的项目,血清用量不同,吸样前后和深度不同,其影响相当复杂。3. 如何减少风干对测定结果的影响:Access 仪用户手册确定的仪器检测速度为100T/ hr ,得到第一个结果仅需15～30 min ,这仅适合β2HCG、肌钙蛋白等项目。在实际工作中,如做甲状腺5 项,10 个样品杯在1 个架上仅吸样就需65 min。因此如果将6 架的样品同时上机,在稀释第1 ,2 架时,排风口正好对准5、6 架吹,势必风干过大。为减少风干,应做到待前一架样品吸样完毕后,再上另一架;复查测定结果或追加检测项目应另吸样品,不使用已上机多时的剩余样品。同时,厂家也应针对此问题进行产品改进。