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[微生物] 鼻咽拭子采集要点及注意事项

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发表于 2017-3-16 01:19:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
  一、采样管:应为塑料管,要求为:长度约10cm,直径约1.5-2cm,容量为10ml,管口带有螺旋丝,管盖内有气垫圈。
    二、拭子:用带有无菌聚丙烯纤维头或脱脂棉头的聚丙烯杆的拭子。
    三、采样液:用Hank氏液,有市售半成品或自己配制。
    1、10倍Hank氏母液的制备:
    (1)所需液体:
    A液:
   
  
构成成分

  
重量或体积

  
NaCl

  
80g

  
CaCl2

  
1.4g

  
KCl

  
4g

  
MgSO4·7H2O

  
2g

  
双蒸水

  
约450ml


B液:   
  
构成成分

  
重量或体积

  
Na2HPO4

  
0.6g

  
KH2PO4

  
0.6g

  
葡萄糖

  
10g

  
双蒸水

  
约450ml


    C液:1%酚红溶液:16ml
    (注:1%酚红溶液的配备:在乳钵内加入酚红1.0g、 1mol/l的NaOH溶液4-7ml,研磨使其完全溶解,在用双溜水稀释到100ml,高压消毒,在室温或4℃贮存)
    (2)10倍Hank氏母液配置方法:
    ①依次在水中溶解上述成分;
    ②将B液慢慢地加到A液中,同时不断搅拌;
    ③然后加入C液;
    ④加双溜水到1000ml;
    ⑤加压过滤除菌(或加氯仿2ml);
    ⑥4℃贮存。
    2、Hank氏使用液的制备:
    ①将10倍Hank氏母液500ml加到4500ml双蒸水内,摇匀;
    ②8磅20分钟,高压灭菌;
    ③冷却到室温,可用5.6%NaHCO3调PH值7.0-7.2;
    ④分装采样管,每个管中4ml;
    ⑤置-20℃冷冻保存备用(若无污染,可使用半年)。
    (注:5.6% NaHCO3溶液的配备:称重5.6g NaHCO3溶解到100ml双蒸水中,分装,高压灭菌,置-20℃冷冻保存备用。)
    四、采样方法:
    1、咽拭子:
    (1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下;
    (2)让病人头部微仰,嘴张大,并发“啊”音,露出两侧咽扁桃体,手持拭子在病人两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次;
    (3)将拭子头浸入采样液中,把拭子头部与管壁接触几下,使标本尽量多的保存在采样液中,弃去拭子手捏尾部部分。
    2、鼻拭子:
    (1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下;
    (2)让病人头部自然放松,将拭子贴鼻孔壁慢慢转动进入病人一鼻孔内,至鼻腭处,然后边擦拭边旋转慢慢取出。以同一拭子,用同样的方法擦拭另一鼻孔;
    (3)将鼻拭子放入已收集咽拭子的采样管中,方法同步骤四、1、(3)。
    这样,一支采样管中就有一支咽拭子、一支鼻拭子,即所谓的鼻咽拭子管。
    五、注意事项:
    1、采样对象应为发病3日之内且发热≥38℃者;
    2、采样液应放在冷藏箱(放冰排)中,带到采样地点。
    3、采样管容量应为10ml左右,不宜太大,以免影响标本的后期处理;
    4、采样管要用塑料管,防止运输过程中发生意外;
    5、鼻咽拭子的杆最好是加长的,便于采样时使用;
    6、鼻拭子的头部应尽量做的小些,以避免采样时给病人鼻部带来不适;
    7、采样管中的液体不要多于4ml,以免影响样本的浓度;
    8、必要时,可采集双份鼻咽拭子,作为平行样;
  <P>  9、采集完的标本应立即放在4℃冰箱内(若现场没有冰箱,可立即放入冷藏箱内),在24小时内用冷藏箱运送至实验室进行检测(同时,附带详细的样本登记表)。若24小
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