5种结核杆菌抗体检测试剂对肺结核的诊断效能评价

灌无节制

    华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科      吴士及，陈家逸，黄劲，何虹燕，段金玉，殷波涛，朱琴，孙自镛
       摘 要：目的 评价5种结核抗体检测试剂盒在肺结核诊断中的诊断效能。方法 采用酶联免疫吸附法和胶体金法以上海奥普(奥普)、天津中新科炬(中炬)、杭州艾康(艾康)、韩国SD(SD)和北京万泰(万泰)5种不同试剂检测97例肺结核患者、62例非肺结核患者和100例健康人血清中的结核抗体。结果 奥普、中炬、艾康、SD、万泰5种试剂盒的灵敏度分别为78.4% 、78.4% 、90.7% 、69.1% 和67.0%；特异度为88.9% 、71.0% 、80.2% 、99.4% 和95.1%；阳性预测值分别为80.9%、61.8% 、73.3% 、98.5%和89.0%；阴性预测值分别为87.3% 、84.6% 、93.5% 、84.3% 和82.8%；临床诊断符合率分别为84.9% 、73.7% 、84.2% 、88.0%和84.6%；R0C曲线下面积分别为0.833、0.731、0.844、0.851和0.821。结论 奥普、艾康、SD和万泰的诊断效能类似，均优于中炬。
       关键词：结核抗体； 结核，肺； 诊断效能

       结核病被列为中国重大传染病之一，是严重危害人民群众健康的呼吸道传染病。目前一般采用的检测血清结核抗体的方法有ELISA法和胶体金法，这2种方法检测患者血清抗结核抗体简便、快速、特异性好，是目前最理想的诊断方法。而结核抗体的诊断试剂多种多样，对检测结果的影响也不尽相同。本研究采用ELISA法和胶体金法，用5种不同的试剂，分别检测97例确诊肺结核患者样本、100例健康人样本和62例非肺结核病患者样本中的血清结核抗体，并对结果进行比较，评价各种试剂对结核病的诊断效能。
1 资料与方法
       1．1 一般资料  肺结核组97例(男性73例，女性24例)均为确诊肺结核住院患者，痰菌涂片与培养均阳性[涂(+)培(+)]者86例，涂片与培养均阴性[涂(—)培(—)]者11例，年龄15～85岁，平均年龄48.8岁。疾病对照组为来自临床确诊为非结核病的62例住院患者，其中男性35例，女性27例，年龄17～79岁，平均年龄46.85岁。健康对照组为健康体检者100例，其中男性51例，女性49例，年龄23～ 73岁，平均年龄39.78岁。
       1．2 主要试剂 上海奥普生物医药有限公司生产的迪比多结核分枝杆菌抗体诊断试剂盒(胶体金法)，批号20111003，以下简称奥普。天津中新科炬生物制药有限公司生产的结核分枝杆菌(TB)IgG抗体检测试剂盒(胶体金法)，批号201106231，以下简称中炬。杭州艾康生物技术有限公司生产的结核分枝杆菌抗体检测试剂盒(胶体金法)，批号201108339，以下简称艾康。韩国SD标准诊断公司生产的结核杆菌抗体检测试剂盒(胶体金法)，批号046041，以下简称SD。北京万泰生物药业股份有限公司生产的结核杆菌IgG抗体检测试剂盒(ELISA法)，批号TB20110905，以下简称万泰。
       1．3 方法 严格按照5种结核杆菌抗体检测试剂盒所附的说明书来进行操作。
       1．4 统计学处理  本实验试剂盒的评价通过计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率来进行比较分析。所有数据均采用SPSS19.0软件进行统计学分析，绘制ROC曲线。计数资料运用X2 检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
       2．1 5种试剂检测结果 5种结核杆菌抗体检测试剂盒检测97例肺结核病患者、62例非肺结核疾病患者和100例健康体检者标本的结果见表1。97例肺结核患者中，奥普、中炬、艾康、SD、万泰结核抗体检测试剂盒检测的阳性率分别为78.4% 、78.4% 、90.7% 、69.1% 、67.0% 。艾康的灵敏度明显高于其余四者，差异有统计学意义(P<0.01)。162例对照组中，上述5种试剂分别检测出18、47、32、1、8 例阳性。

       2．2 诊断效能评价 奥普检测结核病的灵敏度为78.4% ，特异度为88.9%，阳性预测值为80.9%，阴性预测值为87.3%，符合率为84.9%；中炬检测结核病的灵敏度为78.4%，特异度为71.0%，阳性预测值为61.8%，阴性预测值为84.6%，符合率为73.7%；艾康检测结核病的灵敏度为90.7%，特异度为80.2%，阳性预测值为73.3%，阴性预测值为93.5%，符合率为84.2%；SD 检测结核病的灵敏度为69.1%，特异度为99.4%，阳性预测值为98.5%，阴性预测值为84.3%，符合率为88.0%；万泰检测结核病的灵敏度为67.0%，特异度为95.1%，阳性预测值为89.0%，阴性预测值为82.8%，符合率为84.6%。艾康的诊断敏感性优于奥普、中炬、SD和万泰，差异有统计学意义(P<0.01)，后四者间差异无统计学意义(P>0.05)。SD的特异度优于万泰，差异有统计学意义(P=0.036)，且明显优于其余三者(P<0.01)；万泰的特异度优于奥普、中炬以及艾康，奥普的特异度优于中炬和艾康，差异均有统计学意义(P< 0.01)；而中炬和艾康的特异度相当(P=0.07)。5种试剂的ROC 曲线下面积分别为0.833、0.731、0.844、0.851和0.821。
3 讨 论
       肺结核病的诊断金标准以病原学方法(痰涂片或痰培养)为主，该法特异度高，但检出率低，尤其是对于涂片阴性或者无痰患者，初步诊断较为困难，因此血清结核抗体的检测日益受到重视，对临床诊断有着重要参考意义。目前，结核抗体检测试剂盒很多，质量参差不齐，另外，由于使用的抗原种类和纯度不同，检测方法不同等原因，致使不同厂商的试剂盒应用范围也不尽相同。因此，笔者对目前商品化试剂中常用的5种试剂盒检测结果进行了比较，以评价其对肺结核病的诊断效能。
       本研究结果显示，5种试剂盒的灵敏度由高到低分别是艾康(90.7% )、奥普(78.4% )、中炬(78.4% )、SD(69.1% )和万泰(67.0% )，艾康的诊断敏感性明显优于其余四者，而其余四者之间并无明显差异。在97例肺结核患者中，5种试剂均不同程度地出现了假阴性结果，可能的原因之一是各试剂盒抗原组成成分的差异。用于结核血清学实验的众多抗原组分中，38KDa重组蛋白是对结核分枝杆菌最为特异的抗原组分，而也正是由于其高度特异性，使得其灵敏度通常较低。本实验中，SD 试剂盒主要采用了重组38KDa抗原，其灵敏度(69.1% )与国内文献报道的65.1%类似，高于国外学者报道的55%。万泰试剂盒采用5片段抗原，含有不同来源的卡介苗所缺失的片段，可检出结核分枝杆菌分泌性磷酸酯酶(TB-SA)，该酶仅存在于致病性的结核分枝杆菌中，是区分结核分枝杆菌的致病性较理想的抗体。另外，结核病的不同阶段其抗体滴度不同，例如结核病患者在治疗后或者处于相对稳定状态时，抗体检测可出现阴性结果。在结核感染早期，抗体尚未产生或滴度很低时检测血清抗体同样可能为阴性结果。
       本研究中5种结核抗体检测试剂盒的特异度由高到低分别为SD(99.4% )、万泰(95.1% )、奥普(88.9% )、艾康(80.2% )、中炬(71.0% )。假阳性率分别为SD(0.6% )、万泰(4.9% )、奥普(11.1% )、艾康(19.8% )、中炬(29.0% )。SD对肺结核的诊断特异度最高(P< 0.05)。不同试剂盒的抗原纯度以及对结核分枝杆菌的特异度不同是出现这些假阳性的可能原因之一。另外不同分枝杆菌间抗原的交叉反应也是造成假阳性的重要原因。奥普、中炬、艾康、SD和万泰的阳性预测值分别为80.9% 、61.8% 、73.3% 、98.5% 和89.0%，阴性预测值分别为87.3% 、84.6% 、93.5% 、84.3% 和82.8%，临床诊断符合率分别为84.9% 、73.7% 、84.2% 、88.0% 和84.6% 。另外，上述5种试剂的ROC 曲线下面积分别为0.833、0.231、0.844、0.851和0.821。由此可知，除中炬外，奥普、艾康、SD和万泰对肺结核的诊断符合率以及诊断准确性无明显差异(P>0.05)，其中5D 的诊断效能最高。另外，SD的阳性预测值最高，即其检出结核抗体阳性时，98.5% 可诊断为肺结核病，而阴性预测值最高的是艾康，当其检出结核抗体为阴性时，93.5% 的可能性诊断为非结核病。
       综上所述，5种试剂盒中，奥普、艾康、SD和万泰对肺结核的诊断效能近似，均优于中炬。而艾康的诊断灵敏度最高，在结核病流行调查和筛选可疑患者时，可以选用此灵敏度较高的试剂盒。在用于临床诊断时应更加注重检测系统的诊断特异度。本研究中的疾病对照组是由肺部真菌感染、上呼吸道感染、结核病史、肺肿块、肺转移癌等确诊排除活动性结核的疾病组成，这些疾病都较容易被误诊为肺结核病。因此在重要的鉴别诊断或结核患者的确定诊断时，应选用特异性强、阳性预示值高的检测系统。
                                                                                                                                              编辑：范伟伟