3种真空采血管在临床生化检验中的应用和评价

财小弟

       【摘要】 目的 观察3种真空采血管采集、保存样品对生化检验结果的影响，评价其在临床检验中的应用价值。方法 (1)收集30例受检者的分离胶促凝真空管、无添加剂真空管以及不合分离胶的普通促凝真空管制备血清，采用东芝TBA-120FR全自动生化分析仪进行29项常规生化项目检测，分析结果差异有无统计学意义；(2)对2～ 8℃ 冰箱保存的分离胶促凝管原管血清3O例，分别于第1、3、5、7、9、12、15天测定9项血清酶类和血糖，观察其活性和稳定性。结果 (1)3种真空采血管在多数生化检验项目上的结果比较，差异无统计学意义(P>0．05)，但普通促凝真空管在血清钾、乳酸脱氢酶(LDH)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)上与分离胶促凝真空管和无添加荆真空管组间比较差异有统计学意义(P<0．05)；(2)保存于分离胶促凝管的各种酶活性和血糖在1 5 d内(LDH在9 d内)比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论 (1)临床实验室有必要对所采用的真空采血管进行某些指标的比对实验，判断其是否适合临床检验工作质量要求。(2)分离胶促凝管原管血清在2～8℃ 冰箱可以长期保存不影响酶类活性和可防止血液离体后的糖酵解。
      【关键词】分离胶； 促凝管； 血清； 生化指标

       分析前质量控制是实验室质控的一个重要组成部分，而实验室样本的正确采集、处理和保存又同分析前质量控制息息相关。真空采血器在采取血样、分离血清、标本传递、直接上机、储存、废弃物处理等均为一体化的特点，既简化了操作步骤，防止交叉污染；又大大提高了检验效率，减轻了劳动强度，因而被广大医疗单位广泛使用。现在市面上生产真空采血管的厂家很多，所使用的材质不尽相同，为了评价其实用性，笔者采用了3种生化检测常用的真空采血管采集血液，实验观察其血液凝固时间、血清分离质量及对29项生化检验结果的影响；探讨分离胶促凝管长时间保存对血清酶类活性和血糖稳定性的影响，现将结果报道如下。


1 材料与方法
       1．1 标本来源 随机选取本院门诊患者30例，清晨肘静脉采血，一针三管，每管5 ml 。
       1．2 真空采血管无添加剂真空管，美国DB公司生产；分离胶促凝管真空管(KJOSOAS)由江苏康健医疗用品有限公司提供；普通促凝真空管由另一个国内厂家提供。
       1．3 仪器东芝TBA-120FR全自动生化分析仪。
       1．4 试剂及标准质控品 由上海复星长征医学科学有限公司、上海科华东菱诊断用品有限公司提供，分析参数参照说明书设定。
       1．5 检测项目 谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、a—羟丁酸脱氢酶(a—HBDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK—MB)、碱性磷酸酶(ALP)、L-r-谷氨酰基转换酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、总胆红素(TB)、结合胆红素(DB)、尿素(BUN)、肌酊(Cre)、尿酸(UA)、二三酰甘油(TG)、胆固醇(CHO)、葡萄糖(GLU)、胆汁酸(TBA)、胆碱酯酶(CHE)、高密度脂蛋白(HDL )、低密度脂蛋白(LDL )、载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)、K、Na、Cl、Ca、CO2共29项。
       1．6 方法
       1．6．1 测试方法 (1)对30例门诊患者用分离胶促凝真空管、无添加剂真空管和普通促凝真空管同时进行一针三管清晨空腹静脉采血，每管5 ml；室温放置，并记录血液凝固时间，待血样完全凝固后以3 000 r／min离心10 min，观察血清分离效果。(2)将上述3种不同真空管分离的原管血清直接上机测定29项生化指标。(3)2～8℃冰箱保存原管血清6 d，每天肉眼观察是否溶血。(4)对2～8℃冰箱保存的分离胶促凝管原管血清30例，分别于第1、3、5、7、9、12、15天测定9项血清酶类和血糖。
       1．6．2 统计学方法 测定结果以 X±S 表示，应用SPSS12．0统计软件分析，多样本比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验，以P<0．05为差异有统计学意义。


2 结 果
       2．1 标本采集质量及分离、保存效果观察 用无添加剂真空管、普通促凝真空管和分离胶促凝真空管采集同一供血者血样，记录血液凝固时间、观察分离质量(血液凝固后，3 000 r／min离心10 min，上层为血清，底层为血细胞，以上层无溶血、无纤维蛋白块为合格)以及保存效果，结果见表1。

       2．2 临床生化指标的观察全血标本分离出血清后，分成常法血清组、普通促凝血清组和分离胶血清3组。原管直接上机测定K 、Na、Cl 等29项生化指标，各组之间结果比较采用单因素方差分析；有26项指标差异无统计学意义，但K 、LDH、HBDH 结果组问比较差异有统计学意义；作两两比较(LSD)显示普通促凝管组(I 组)与无添加剂管和分离胶促凝管组(J组)差异有统计学意义(P<0．05)，结果见表2。

       2．3 对2～8℃冰箱保存的分离胶促凝管原管血清30例，分别于第1、3、5、7、9、12、15天测定9项血清酶类和血糖，经ANVOA分析，显示LDH 天间比较差异有统计学意义(P<0．05)，作两两比较显示LDH从第12天开始差异有统计学意义(P<0．05)。两两比较结果分别为第3天P=0．578，第5天P=0．585，第7天P=0．404，第9天P=0．309，第12天P=0．038，第15天P=0．031。其余的血清酶类和血糖天间比较差异无统计学意义(P> 0．05)，结果见表3。

3 讨 论
       3．1 促凝剂是为了临床检验中快速分离血清标本而研制的非活性或非生理性成分，一般常用硅石粉、玻璃粉、碳素粉末及蛇毒等促凝成分经特殊加工而成；血液促凝剂能激活血浆中和血小板中的部分凝血因子，生成凝血活酶，促进血液凝固，加速血块回缩，达到快速分离血清的目的。但有实验证明促凝剂在使血液快速凝固、纤维蛋白原在促凝刹中酶的作用下急速变为纤维蛋白过程中，脆弱的红细胞受到挤压变形容易引起轻度溶血。有人比较5种真空采血管促凝剂，用DB为对照，标准国产促凝管3／5不合格，内壁未硅化，血凝黏壁，促凝管致溶血明显；胡望平等通过测定游离血红蛋白(FHb)证实不同促凝管造成红细胞离体后微量溶血程度有明显差异。本实验表明，促凝剂质量不佳造成标本溶血，使K、LDH、HBDH 检测结果出现差异。故在选择含促凝剂的真空采血管时应谨慎选择，最好能进行某些指标的比对实验，判断其是否适合临床检验工作质量要求。
       3．2 分离胶是一种疏水性的具有触变性的有机化合物，主要由硅橡胶、大分子碳氢化合物、疏水胶等组成，其密度为1．05，介于血清(1．02)和血块(1．08)之间，在离心力作用下，分离胶在血清和血块之问形成隔离层，能有效阻止糖等物质的体外代谢以及细胞内浓度高物质的释放所致检测结果降低或增高；同时分离胶也是一种惰性物质，其成分对血液不具活性，对以血清检测为对象的临床生化项目无影响；分离胶的离心条件推荐为3 000 r／min离心5～10 min，离心力过低，分离胶逆转不佳，离心时间过长，则分离胶凝聚体中由于氢键被切断后难以形成网状结构，而失去触变性；如果离心前血液没有完全凝固，可使纤维蛋白混杂在隔离层，则血清保存过程中将受到血块中各种细胞内部高浓度物质的影响。
       3．3 分离胶促凝管是在玻璃试管或塑料试管中同时添加促凝成分和分离胶，达到既能快速分离血清义能使血清中各种物质的浓度保持相对稳定。一般认为，玻璃采血管保存血清的期限以2～3 d为宜，塑料采血管保存血清为3～4 d，其中血清钾冷藏保存8 d含量不变；徐根云等报道使用分离胶促凝管采集的标本保存96 h后血糖也无任何下降现象；华永川等报道采用分离胶促凝管保存的10项血清酶类活性在9 d内天间比较差异无统计学意义；本实验结果显示，9种血清酶类和血糖在分离胶促凝管中至少可以稳定15 d(LDH在9 d内)。通过查阅各种文献，有不少作者的观点认为使用新鲜的分离胶血清与常法分离的血清测定结果相比是一致的，可以保证结果的准确性和可靠性。而笔者则认为使用分离胶促凝管采血后，在血液完全凝固后及时、正确离心，才是充分发挥其优点的保证。

                                                                                                 编辑：范伟伟