用新鲜全血校准血细胞分析仪的方法

进进

【摘要】目的建立用新鲜全血校准血细胞分析仪的方法，保证临床标本在不同型号的血细胞分析仪检测结果的可比性、一致性。方法以血细胞分析仪BC—5500为参比仪器，对新鲜伞血的RBC、WBC、Hb、MCV、PLT进行定值，进而对ABX—60型血细胞分析仪进行校准，然后检测其结果的偏差。结果两台血细胞分析仪测定新鲜血的全血细胞计数结果非常接近，相对偏差小于1/2 CLIA’88。结论用参比血细胞分析仪定值新鲜全血的方法可用于同室多台血液分析仪的校准及比对，既保证了各仪器结果问的精密度及准确度，又降低了成本。
      【关键词】新鲜全血；血细胞分析仪；校准； 比对实验

      由于血细胞分析仪检测结果准确、精密度高、操作简单快速，现已进入国内大小医院，且有的实验室使用了多台不同厂家或不同型号的仪器。不同血细胞分析仪标本榆测结果存在一定的误差。血细胞分析仪所得参数不但用于疾病的诊断还用于疾病治疗的连续监测，某砦实验室使用非配套校准物、质控物校准血液分析仪，给实验结果带来过高的系统误差。经严格标定的新鲜全血用于多系列血细胞分析仪的校准，是一种经济、可靠的校准方法，提高了同一实验室不同仪器之问检验结果的可比性。具体操作方法如下。
1 材料与方法
1．1 材料  (1)仪器和试剂：深圳迈瑞BC—5500全自动血细胞分析仪及配套试剂，法国ABX—60半自动血细胞分析仪及配套试剂。(2)校准物及质控物：BC—5500血细胞分析仪的配套校准物及定值质控(迈瑞公司生产，批号zxll209c，效期：20090916)。(3)EDTA—K2真空抗凝管(山东威海生产，批号20090720，效期201107)。
1．2方法
      1．2．1  抽取满足下列条件健康者新鲜全血标本1份：WBC(4．0—10．0)×109／L，Hb 100～170 g／L，HCT为0．35—0．55，PLT(100～300)×109／L。用EDTA—K2抗凝，量为30 ml。保存在3个试管内，分别用于仪器重复性、定值及校准。
      1．2．2  用1份EDTA—K2，抗凝的新鲜血在2台血细胞分析仪上：连续测定10次，分别计算Hb、RBC、WBC、PLT、MCV的变异系数。
      1．2．3  用配套的校准物对BC—5500 血细胞分析仪进行校准，校准前，先对仪器进行必要的保养，当本底的范围、重复性及携带污染率在说明书规定的范围内，即可对仪器进行校准，校准按说明书进行。
      1．2．4  取1份EDTA—K2抗凝的新鲜血，在校准后的BC—5500 血细胞分析仪上连续测定10次。分别计算Hb、RBC、WBC、PLT、MCV的均数、标准差和变异系数，以此值作为ABX—60血细胞分析仪的校准定值。
      1．2．5  取1份新鲜全血，分别在校准后的2台仪器上进行测定，每份标本测定10次，计算出各台仪器10次测定结果的均值和变异系数及偏差。
2 结果
2．1 两台血细胞分析仪校准前的重复性测定CV％(均在全血模式下进行)见表1，从表1可以看出，仪器重复性很好，符合校准条件。

2．2 BC—5500 血细胞分析仪校准前后定值情况及相对偏差(n=5) 相对偏差计算公式：偏差=[(均值一靶值)÷靶值]×100％，偏差WBC≤1．5％、RBC≤1．0％、Hb≤1．0％、HCT≤2．0％、MCV≤1．0％、PLT≤3．0％，仪器无需校准，反之需调整原校正系数，但此次操作，笔者将不需要校准的项目也进行了校准。计算公式：新校正系数=(靶值÷均值)×原校正系数，见表2。校准后BC—5500血细胞分析仪对新鲜全血定值情况见表3。用定值新鲜全血校准ABX—60血细胞分析仪校准前后的校准因子见表4。


2．3 校准后ABX—60血细胞分析仪校准前后的结果与BC—5500(x±s)间的比较及偏差。美国病理实验室要求允许误差以CLIA'88标准的1／2为允许误差：采用WBC±7．5％、RBC ±3．5％、Hb±3．5％、MCV±3．5％、PLT±12．5％的变异范围，见表5。表5表明，相对偏差均在CLIA’88标准的1／2的范围内，说明仪器具有可比性。

3 讨论
      由于各大中型医院的血液常规数量较大，大多有几台血细胞分析仪同时用于临床标本的检测，县级医院以上的单位一般至少有2台以上的血细胞分析仪，省市级医院甚至多达七八台，且不同的血细胞分析仅生产厂家各自使用的测定原理和方法不尽相同，使得测定结果及参考范围有所差异，因此如何使这些仪器的检测结果保持较好的一致性、可比性，就成了目前急需解决的问题。
      为了保证仪器检测结果的准确性，仪器在更换部件、大型维修或长时间使用后，需要进行仪器的校准，标准物在仪器测定结果是否准确的问题上有决定性的作用。为保证血液细胞分析仪的准确性，最好使用仪器生产厂家推荐的配套校准物对仪器进行校准，但由于校准物价格昂贵且有效期特别短，可只购买一台性能较好仪器的配套校准物。采用能够溯源的配套校准品校准参比仪器BC—5500，然后对新鲜全血定值。再以此定值的新鲜全血作为校准物校准其ABX—60，结果表明，仪器校准后大多数参数的检测结果与
定值的偏差比校准前明显减小。由于新鲜血稳定性差，为了保证在一定时间(8 h内)完成校准工作，最好各实验室自己对新鲜血进行定值。而新鲜血定值准确与否，对校准结果至关重要。根据ICSH颁布的文件的要求，血液自动分析的检测结果只有直接或间接地溯源至参考方法，才能保证结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性。
      但每天均对仪器进行校准，显然不切实际，各个实验室可以根据自己的具体情况确定校准周期，但至少半年1次。为保证各台血细胞分析仪的准确性与可比性，可根据文献建立新鲜全血比对的方法。
      新鲜全血是最佳的比对实验标本及校准物，确立实验室内的标准参比仪器，再建立新鲜全血在多台仪器间的比对及校准体系，在拥有多台不同品牌、不同型号的血细胞分析仪的大、中型医院实验室，不失为一种简便、经济的措施。
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