血沉检测的标准化

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血沉检测的标准化
上海市临床检验中心 金大鸣 李泳
前言
　　血沉检测已有八十多年历史。最初为瑞典医生 F ? hraeus 在 1918 年发明，其后于 1920 年 Westergren 也提出了他的方法，并于 1926 年规范了血沉管，加了管壁刻度，建立了规范操作，成为流传于 世 最广的方法。上世纪三十年代、四十年代先后出现了一些改良法如 Wintrobe-Landisberg 法（ 1935 年）改用 120mm 长的测定管，内径 2.5mm ，可与红细胞比容通用血样；至 1940 年又出现了 Cutler 法，也是短管，全长为 70mm ，内径定为 5.0mm ，其他还有一些大同小异的方法。国内上述方法均有前辈使用，解放后又采用过前苏联的微量法。近二十多年来，经卫生部医政司、卫生部临床检验中心及中华检验学会等的推荐， Westergren 法（魏氏法）已成为国内的规范方法。最近十余年来由于对生物安全问题的日益重视，易于生物污染的手工操作已开始向半自动化或全自动化方向发展，其操作另由生产厂商规定，结果参差不一，目前既有进口产品，也有国产产品，为了有所比对，有所溯源，血沉检测的标准化也成为紧迫的任务之一。
　　国际血液学标准化委员会（ ICSH ）、美国 NCCLS ，以及 WHO 均组织专家对血沉的标准化作过多次探讨，先后分别发表过多 个 文件，其中影响最大的为 ICSH 的推荐法（ 1993 ），及 NCCLS 的代号为 H 2A 4 血沉参考法和选择法认可标准。他们均以魏氏法基础，探讨了从采样 至报告 结果的各个细节，为血沉检测的标准化作出了重大贡献。
ICSH 和 NCCLS 标准化等级分类
　　ICSH 和 NCCLS 均采用标准化等级分类，内容基本相似，由于 NCCLS 的文件较新，主要参照后者。血沉检测虽历史甚久，但检测原理还不够清楚，影响 不 准确度、 不 精密度的各种因素也还未完全掌握和控制，因此迄今仍未建立确定性方法。血沉检测目前最高等级为参考法，其次为标准化方法，（相当于二级参考法），再次为选择法即工作法或常规法。由于血沉的半自动和全自动化检测研发起步较晚，血沉的校正品、控制品的研发尚难满足临床检验需求，也是血沉标准化的难题之一。
参考法 ：血沉管为全长 300 ± 1.5mm 两端通的规范 200mm 刻度魏氏管（玻璃制），管内径 2.55mm 或更大些，管内均匀误差小于 5 ％，横轴与 竖轴差不 大于 0.1mm ，外径 5.5 ± 0.5mm ，管壁刻度 200mm 误差 ± 0.35mm ， 1mm 间距误差为 < 0.2mm 。所检测血样为 EDTA 抗凝未 稀释样品，其红细胞比容（ PCV ）为 0.35 或更低（ 0.33-0.35 ）。
标准化方法 ：血沉管为有 200mm 刻度两端通玻璃制或塑料制魏氏型血沉管，内径至少 2.55mm ，所测血样为 EDTA 抗凝未 稀释样品，其 PCV 为 0.35 或更低。
选择法 ：又称工作法或常规法，具有减少生物危害功能，魏氏管可用一次性玻璃或塑料制品，或其他认可的容器替代。这类器材厂商和用户要保证检验结果能与标准化方法相比对。
　　上述三个等级的方法中有几点较为重要，参考法和标准化均要求 EDTA 抗凝，且要求血样 PCV 为 0.30-0.35 ，不加调整处理，要求这样的样品相当困难，必要时可以按公式加些自身血浆，或减少些红细胞，即将 7ml 血液均分为 2 管，取 1 管离心沉降，分离 血浆并测 PCV ，代入下列公式：
3.5 （ PCV/0.35 ）－ 3.5 ＝需要加入的血浆量
　　将血浆加入另 1 未离心的 3.5ml 血液中，混匀后再核对 PCV 是否已 ≤ 0.35 。 PCV 小于 0.35 （ ICSH 为 <0.36 ）才会有较好的重复性，与此有关的另一条件为血沉管内径必须 2.55mm 或更大些，小于 2.55mm 内径也会使重复性不良， ICSH 曾定 2.55 ± 0.15mm ， 2.55 ＋ 0.15 ＝ 2.7mm 不影响重复性； 2.55-0.15 ＝ 2.4mm ，则使重复性降低，故以 ≥ 2.55mm 为妥。
　　由于参考法与标准化方法要求 EDTA 抗凝，且不稀释，则与常规操作又有矛盾，一般 EDTA 抗凝血液经稀释（ 4 ： 1 ）后，血沉均会减慢，血沉值减小，因此参考法或标准化方法的血沉 值还要 经过一次换算，公式为
（未稀释血样 ESR × 0.86 ）－ 12 ＝校正 ESR
例：参考法血沉为 50mm 则代入公式换算为 31mm
　　ICSH 已 作出 参考法或标准化方法与常规 法结果 的对照表，本例参考法 50mm ，常规法查表为 21 -41mm 。参考 法结果 经换算稀释法校正值为 31mm ，处于 21 -41mm 之间， ICSH 的对照表从 15mm -105mm 是一份重要的数据资料，引用若干以示运用，凡认可的常规法所检测结果 95 ％可以与表中范围符合，此表既用于方法学评价，也可用于日常质控。
ESR 标准化      常规法
（未稀释） （ 4 ： 1 稀释）
<P>15  3-13

20  5-17

30  10-24

40  15-32

50  21-41

60  28-51

70&nb