血液分析仪操作规范

夜游神

作者：杨明清
    1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞的人，开始进行红细胞计数则是200年后的事情了，而设计并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。人们可以通过仪器了解血液中的微观物质，因此正确使用仪器就显得十分重要。
    血液分析仪在我省已广为普及，它大胆提高了检验效率。如果能正确使用，会显著提高检验质量。但仪器种类繁多，测定原理各异，在病理情况下，不同仪器对异常标本测定的正确性会产生不同影响。有部分检验人员对如何正确应用仪器认识不足，致使结果准确性受到影响。为了提高检验质量，特提出以下意见供各实验室参考。
1．标本采集
血液标本尽可能用静脉血，少数不易取静脉血者如婴儿、大面积烧伤患者等可采用末梢血，末梢血以指尖血为宜，尽量不用耳垂血。
采血前被检查者应处于平静状态，剧烈运动后应静息30分钟后采血。
抗凝剂：使用K2-EDTA，含量为1.5～2.2mg/ml
容器：采用密封式的塑料或经硅化的玻璃容器
采血过程压脉带不要太紧，束臂时间不超过2分钟，采血过程顺利，采血后先拔除针头，然后将血液徐徐注入试管中，轻轻颠倒混匀，避免产生泡沫。
采血后放置15分钟测定，放置24小时内PLT、WBC、Hb、HCT、RBC保持稳定。
2．标本测定：应严格按仪器说明书操作
3．血液分析仪安装条件
3．1机房要求：室内要有一定空间，尽量减少灰尘，室温维持在15~25oC。
3．2电源：要有稳定恒压的电源，最好配备UPS稳压电源，仪器一定要有地线，如果电源插座无地线，可以机壳上另接地线，地线一般可用2、5mm铜芯线接上一块易导电金属深埋于地下。
3．3仪器应放在稳定的工作台上，最好用水泥台，避免震动。
4．血液分析仪的评价
    购买血液分析仪前应参阅有关血液分析仪评价的资料和咨询已用过血液分析仪的用户，并仔细阅读厂家提供的资料。根据这些资料选择适合本单位的仪器，购置仪器后改换重要部件或重大维修后，均需对其技术性能进行测试评价。ICSH公布了对血液分析仪的评价方案，但未公布统一的指标要求，应根据各仪器厂家的有关说明书核对，鉴定是否已达到仪器的出厂要求。
精密度
    精密度包括批内及批间精密度，选择红细胞低值、正常值及高值标本各10份，按常规方法分别测定红细胞数。每份标本重复测定3次，记录结果，将标本放室温2小时，再将每份标本测定3次，可得到不同浓度下的精密度。现以低值红细胞结果为例（见表1），介绍统计学处理方法（单位1012/L）。
全部总和=82.23+83.37=165.6
均值=165.6/60=2.76
假设标本数为µ，批数为v，重复次数为n，则平方和（SumofSquares以下称SSQ）为：
重复试验SSQ=[∑（各测定值）2]-[ ∑（小计）2/n]
=（3.162+3.202……+2.852+2.742）-[（9.512+10.322……+6.382+8.482）/3]
=0.5411
批间SSQ=[∑（纵行之和）2/µ.n]-[（全部总和）2/µ.v.n]
=[(82.232+83.372)/10*3]-(165.62/10*2*3)
=457.0776-457.056
=0.0216
均方（Themeansquare以下称MSQ）为重复试验的MSQ=重复试验SSQ/µ.v.（n-1）
=0.5541/10*2*（3-1）
=0.0136
批间MSQ=批间SSQ/（V-1）=0.0216/（2-1）=0.0216
变异系数（CV）为
批内重复试验CV= *100%= *100%=4.2%
批间重复试验CV=*1=*100=4.26%
应该注意的是高值、正常值、低值标本必须分开进行测定，避免携带污染。白细胞及Hb的精密度可使用同样的方法进行检测。
携带污染率
为避免测高值标本后再测定低值标本时所产生的影响，在做携带污染率试验前，先测一定数量标本，使测定数值达到稳定，然后取一份高值标本，连续测定3次（i1、i2、i3），随后立即取一份低值标本连续测定3次（j1、j2、j3）。携带污染率以下述公式计算：
携带污染率=（j1-j3）/（i3-j3）*100%
例如3次测得高值红细胞结果为7.237，227.30（1012/L），低值红细胞结果为0.64、0.57、0.52（1012/L），携带污染率=（0.64-0.52）/（7.30-0.52）*100%=1.77%，按此法测定红细胞、血红蛋白、白细胞携带污染率各5份。
如果没有极高值和极低值的红细胞标本，可以在预稀释模式以10ml稀释液加30µl正常血液做为高值标本，10ml稀释液加4µl正常血液做低值标本进行测定。白细胞及Hb的携带污染率可使用同样的方法进行检测。
总重复性
<P>包含重复测定的随机误差与携带污染双重变异因素，测定时随机取标本20份（以白细胞测定为例），按常