电阻法血液分析仪原理

司徒凌楚

一、库尔特原理（电阻法原理）


根据上图所示，当定量的血液被吸取并被定量的导电溶液所稀释之后，就被送到检测室。在每一个检测室都有一个小的开口，叫做检测小孔。在检测小孔的两侧有通有恒流直流电的正负电极。当稀释的血细胞通过恒定负压的作用通过检测小孔的时候，电极之间的直流电阻就会发生变化。这种电阻会形成一种同血细胞体积大小成比例的脉冲变化。这些被收集到的关于脉冲变化的数据可以用来画一个反映血细胞大小的颗粒分布曲线。



根据上图所示，这是一个收集到的脉冲图，横坐标是时间，纵坐标是电压，这样，经过检测小孔的细胞脉冲就被连续的记录下来，然后根据平行于横坐标的鉴别线来进行检波分类。这是一个总体的概念，下面详细说明。
二、试剂的功能和作用；
1。 稀释液：稀释血液细胞，防止血液细胞聚集和粘连；保持一定的PH值和渗透压，根据设计理念不同，有高PH，中性PH，等渗，低渗，高渗的区别还有离子强度的差异，这就直接导致血液细胞在稀释液的作用下是保持原有的细胞形态还是收缩细胞或者适度扩张细胞，这也是在直方图上以WBC直方图为例，有的仪器可以将横坐标图形延伸到450FL甚至更远，而有的仪器只能延伸到300--350FL的原因之一；
2。溶血剂：溶血红细胞，打破红细胞，以利于白细胞计数；不让红细胞碎片发生聚集和粘连，防止干扰白细胞计数；让白细胞穿孔，白细胞胞浆流失，白细胞收缩（检测内核）（在其他不同的设备中也有不使白细胞穿孔，而是保持细胞形态的完整）；与红细胞中的血红蛋白结合，快速形成稳定的Fe3+（血红蛋白是Fe2+）用于比色换算出血红蛋白含量；人体血液白细胞当中淋巴细胞最小，中性粒细胞稍大，单核细胞最大，但是从内容物来讲，中性粒细胞的核质比要大于单核细胞，在溶血剂的作用下，细胞收缩至核，所以这个时候淋巴细胞最小，单核细胞稍大，中性粒细胞反而以大细胞形式存在。
3。清洗剂：每测试使用或者关机使用或者定时使用都是根据仪器的设计理念来决定的，作用是彻底清除管道，计数池，检测小孔周围的蛋白沉积，污染，以及不能将清洗剂残液遗留到上述地方影响下次计数结果。
4。 其他：有些仪器在设计的时候还采用了其他的试剂，例如浓缩清洗剂 ，参比液，保养液等等，参比液一般是为血红蛋白提供参比标准的，其余试剂是用来保养或者高浓度清洗计数检测部的。

三，结构
1。 计数池，分为单通道计数和双通道计数，像SWLEAB AC系列，光电的5216,5208,5200,还有其他的类似仪器都只有一个计数池，因此他们共享一个检测电路，通过软件切换或者干脆就通过软件来进行区分，计数的时候先进行RBC/PLT的计数然后再进行WBC/HGB的计数，这种仪器速度较慢，而且容易出现交叉污染，所以不是主流设备，我们在这里不过多解释；双通道计数就是由WBC和RBC分别有不同的计数池，由于溶血剂的作用因此WBC和HGB是在一个通道内完成的，RBC和PLT是在一个通道完成的。这种双通道计数方式绝大多数电阻法血液分析仪都采用。
2。压力系统：在计数过程中需要用到恒定的负压，在其他的动作中也需要正压和负压，因此，有的设备采用真空泵和压力泵，有的设备采用注塞泵，利用注射器的上下移动来提供正压或者负压，有的仪器干脆采用压缩机同时提供正压和负压。采用注塞泵结构简单，无噪音，缺点是需要经常保养（因为要保持严格密封），但成本低廉，压力泵或者压缩机成本高，噪音大，结构复杂，而且控制机构众多。
3。试剂和混合样本的定量，有的采用注塞泵，利用液体不会被压缩的原理利用注射器来进行定量，有些设备采用蠕动泵，有些采用注塞泵和蠕动泵结合，有些采用隔膜泵，隔膜泵的原理是在泵内用隔膜分为气路和液路两个部分，当气路通上负压的时候隔膜移向气路壁，液路室出现真空抽取隔膜泵制造所定量的液体，当气路通上正压得时候，液路受到挤压将液体排除。


<P>注塞泵准确性依赖于严格密封，因此受到的干扰也较大，需要经常性地维护保养，但是成本低廉实现容易因此结构简单，隔膜泵则需要压力泵或压缩机的配合，还需要众多的电磁阀气阀的控制，结构繁杂，成本高，但是速度较之前者要快。 4。样品分配，大多数机器采用一次采样二次稀释，定量分配方面有采用注塞泵的较多，进行分配，例如，注射器采取20UL血液，进入WBC或者混合池与定量的稀释液进行充分稀释混合，然后再吸取20UL（不定，根据仪器设计理念）混合后