三分群血液分析仪的检测原理

枫叶

电阻抗法血细胞计数：利用血细胞通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。白细胞、红细胞的稀释标本在一个负压的控制下，分别通过各自的计数微孔，流入各自通道，然后通过两个光电传感器，将细胞信号甄别、放大、计数。其原理示意图如下：
    图中阴影部分是稀释标本，稀释液是由NaCl等导电物质组成的导电液，当图中所示恒流源起作用时，稀释液将和线路一起组成一个回路，由于负压的作用，血细胞（不良导体）通过计数微孔时，稀释液被细胞代替，引起了阻抗的变化，从而在测量线上产生了电脉冲（如上图），仪器就记录下此电脉冲的数量及幅度（细胞的大小）


（1）、微孔管：在其下端镶有一个标准尺寸大小的红宝石孔。RBC管道孔径：80微米；WBC管道孔径：100微米。易堵塞，防止堵孔和维护。
（2）、微粒计数：细胞以外的杂质将被误认为细胞。保证稀释液的质量和环境的洁净。
（3）、细胞可相互重叠通过微孔，产生偏差：血样要充分稀释WBC 1:450，RBC 1:6205，设计上要有纠正偏差的技术。
（4）、细胞和杂质的鉴别计数：白细胞体积：120—1000fl，红细胞体积：82—98fl，血小板体积：2—30fl。依照脉冲和细胞成比例的关系，设置不同的阈值电位（门限），对同一杯稀释液中细胞成分的电脉冲高低分别计数，并对杂质和细胞碎片进行剔除。因白细胞和红细胞的体积大小之间有交叉，故红细胞要用白细胞225倍的稀释标本，分别测量。

1.直方图的产生：
    直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得到，是反映细胞大小异质性的资料。如图（图2）所示，左图是示波器显示所分析细胞的脉冲大小，右图是相应的体积分布直方图。
    计算机将白细胞体积从30—450fl分为256个通道，每个通道1.64fl，样本中的白细胞依照大小被分别放在不同的通道中，由此，就产生了按照大小、数量绘制的直方图，将各个通道的峰值点用曲线相连产生报告。
    三种细胞的直方图，经仪器内存程序可进一步分析得出：平均红细胞体积、红细胞分布宽度、平均血小板体积以及白细胞三分群的结果。


2.细胞的三分群：
    各种细胞在稀释液中，经溶血剂的作用，在白细胞的膜上打孔，细胞浆漏出，仅留下核与颗粒并使细胞缩小，原来最大的单核细胞经溶血及作用后，体积就落在了小的淋巴和大的中性粒细胞之间，这样就按照体积大小，将白细胞分成三群。分类原理如图（图3）


淋巴细胞：35—95fl; 中间细胞：95—130fl; 粒细胞>130fl
    依照三群细胞在白细胞体积分布的直方图上所分布区域的面积，计算得出每群细胞的百分比，并依照白细胞计数总数，求得每群细胞的绝对值。