UF⁃1000i 尿液分析仪细菌计数筛查社区获得性尿路感染

孤独风

                                                                                                    任春云  金明超  王星  严洪露  陈瑜
                                                                                                        浙江大学附属第一医院检验科
       尿路感染（UTI）是较常见的细菌感染，占社区感染第2 位，目前尿细菌培养仍然是诊断尿路感染的“金标准”，但不少尿培养结果为阴性，且培养周期长，无法准确及时指导临床诊疗。联合使用尿干化学分析、沉渣镜检和尿流式有形成分分析可及时诊断尿路感染并提高检出率[1]。院内尿路感染的患者往往正在使用抗生素等药物，或是尿路插管患者，而社区获得性尿路感染为UTI 的常见类型，与院内感染有本质的区别[2]。本研究评估尿有形成分分析仪在筛查社区获得性尿路感染中的应用价值。
一、对象与方法
       1. 对象：选取2011 年9 月至12 月本院门诊患者中疑似尿路感染的患者346 例，其中男202 例，女144 例，中位年龄52（17～87）岁，并排除近期有住院史及抗生素使用史，按照无菌操作的原则留取清洁中段尿于无菌杯中，女性均清洗外阴后留取标本。
       2. 方法：采用10 μl 定量接种环取尿液标本划线于血琼脂及麦康凯平板上，接种完成后作UF?1000i 尿有形成分分析，得到尿白细胞计数（WBC）和细菌计数（BACT），检测均于1 h 内完成。尿培养平板于35℃孵箱内培养18～24 h 后，计数菌落，以革兰阴性杆菌菌落计数>105CFU/ml，革兰阳性球菌菌落计数>104 CFU/ml 为尿细菌培养阳性，并对菌株进行鉴定。3种以上细菌生长判为标本污染[3]。
       3. 统计学处理：采用SPSS 13.0 软件进行统计分析。UF?1000i 尿细菌计数结果呈偏态分布，两组间比较采用Mann?Whitney U非参数检验。以UF1000i检测为试验方法，细菌培养结果为标准方法，绘制ROC曲线，利用配对χ2 检验及Kappa 一致性检验，比较UF-1000i 尿有形成分分析仪与尿细菌培养结果差异及一致性。
二、结果
       1. 细菌培养：共346 份尿培养标本，其中3 种以上细菌生长10例，被认为是污染所致，未做进一步鉴定。69份培养阳性，阳性率为20.5%（69/336）。革兰阴性杆菌（G—）占76.8%（53/69），大肠埃希菌占59.4%（41/69），革兰阳性菌（G+）占23.2%（16/69）。
       2. UF-1000i尿有形成分分析细菌计数：以尿培养结果为金标准，作ROC曲线，ROC曲线下面积AUCBACT＝0.970、AUCWBC＝0.826，以此作为预测社区获得性尿路感染的细菌学指标，而尿细菌计数比尿白细胞具有更好的效能。见图1。尿细菌计数和WBC取不同阈值获得的敏感度、特异度等指标见表1，表2。CutoffBACT值为50/μl 时，阳性检出率30.7%（103/336），准确度88.1%（296/336），且可筛查69.3%（233/336）的阴性尿培养结果。2种方法阳性率间差异有统计学意义（20.5%比30.7%，χ2＝165.5，P＝0.000），且一致性一般（Kappa＝0.671）。

       3. UF?1000i尿细菌计数与细菌培养菌落计数的关系：设置4个不同菌落计数水平，其对应UF?1000i尿细菌计数结果，得到一定比例关系，约为10 倍左右水平。见图2，表3。
三、讨论
       应用UF?1000i 尿有形成分分析仪细菌计数可以准确、快速筛查尿路感染[4]。院内尿路感染由于留置导尿、长期使用抗生素同时暴露于院内感染细菌之下等原因，与社区获得性尿路感染菌种比例及耐药性不同[5] ，这些都有可能导致尿培养与UF?1000i尿细菌计数结果不符。UF?1000i 筛查尿路感染文献多有报道，阳性标准多为“高于参考值上限”或由仪器厂家提供，并未给出具体阈值。众所周知，尿培养时间长、阴性率高，无法及时指导临床，临床医生往往根据患者主诉、症状及尿干化学和尿WBC 结果经验用药，常导致许多不必要的尿培养和抗生素的使用。UF?1000i 尿有形成分分析仪克服了细菌学其他检查的种种不足，无创检查，快速报告，易标准化，可以提供球菌和杆菌的参考信息。在细菌耐药率逐年升高的背景下，UF?1000i尿有形成分分析仪作为筛查手段，可以减少不必要的抗生素使用和尿培养，提高尿路感染检出率，降低患者医疗费用。
       我们认为敏感度和假阴性率为评价快速诊断筛查试验的主要指标。当CutoffBACT=50/μl时，阳性率30.70%（103/336），敏感度95.70%（66/69），假阴性率4.30%（3/69）。其阳性率显著高于尿培养。若使用“敏感度+特异度”最大原则，获得CutoffBACT=130/μl，阳性率22.60%（76/336），敏感度91.30%（63/69），假阴性率8.70%（6/69），与报道一致[4]。且2 种Cutoff 值的阳性率差异无统计学意义（χ2=234.0，P=0.167），一致性高（Kappa=0.833）。因此，我们认为CutoffBACT=130/μl 更适合临床应用，而CutoffBACT=50/μl 更适作筛查指标。
       我们设置CutoffBACT=50/μl 时，假阴性为3 例（4.3%），1例为大肠埃希菌感染，其原因可能为发生细菌和细胞聚集现象。另2 例革兰阳性菌感染为血链球菌和溶血葡萄球菌，是否与革兰阳性菌结构与核酸荧光染液着色有关，有待进一步研究。
参考文献
[1] 齐杰, 潘健, 韩江, 等. 尿流式有形成分及干化学分析在尿路感染诊断中的应用评价. 中华检验医学杂志, 2009, 32:630?634.
[2] 汪一萍, 倪语星, 孙景勇, 等. 社区与院内尿路感染的病原学比较及抗生素耐药分析. 中华医院感染学杂志, 2005, 15:586?589.
[3] 叶应妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程. 第3 版.南京: 东南大学出版社, 2006: 744.
[4] Manoni F, Fornasiero L, Ercolin M, et al. Cutoff values for bacteria and leukocytes for urine flow cytometer Sysmex UF ?1000i in urinary tract infections. Diagn Micr Infec Dis, 2009,65: 103?107.
[5] 倪英, 尉晨, 李光辉, 等. 医院获得性尿路感染的病原菌分布及危险因素logistic 回归分析. 中华医院感染学杂志,2011, 21: 3622?3624.
                                                                                                                                编辑：范伟伟