提高强生干化学法测定24小时尿蛋白准确性的探讨

孤独狼

【摘要】  目的  探讨VITROS 950测定24h尿液蛋白加二甲苯做防腐剂对结果是否有干扰。方法  通过测定新鲜尿液的尿蛋白浓度作为对照，测定室温放置24h后尿液与添加了二甲苯的尿液中的尿蛋白的值是否具有显著性差异。结果 VITROS 950测定24h尿蛋白时，未使用防腐剂和使用防腐剂的标本测定结果有显著性差异。结论 干化学方法测定24小时尿蛋白时可以添加二甲苯作为尿液防腐剂。

【关键词】  尿蛋白  防腐剂  二甲苯
        
    蛋白尿是肾病患者常见的重要临床表现之一。尿液中蛋白定量分析对于肾脏病变的诊断、治疗及预后有着一定的意义。使用强生干化学分析仪测定24h尿蛋白的浓度，所受干扰影响因素较湿化学小。本文通过以下实验探讨测定24h尿蛋白加防腐剂对结果是否有影响。
        
1  材料与方法
        1.1  仪器
        强生公司VITROS 950 全自动干化学分析仪及泰利特500尿液干化学分析仪。
        1.2  试剂
        1.2.1 强生公司原装干片试剂，西门子尿十项干化学试剂条。
        1.2.2  防腐剂：二甲苯。
        1.3  方法   
        1.3.1  留取泰利特500干化学分析仪测定新鲜尿液标本定性（+～++）门诊及病房病人尿标本20份，同时使用VITROS 950测定尿液蛋白浓度。
        1.3.2   测定尿蛋白浓度后的尿液再分为2份，一份2ml尿液以10ml/L浓度添加二甲苯20μl充分混匀，另一份不作任何处理。两份均在同等外界条件下密封放置室温储存，24h后同时使用强生VITROS 950干化学分析仪检测尿蛋白浓度。
      
2  结果
        使用VITROS 950测定新鲜尿液的尿蛋白浓度作为标准， 24h后测定尿液与不添加防腐剂的尿液中的蛋白浓度。
        2.1 加甲苯放置室温24h后测定与新鲜标本比较，P>0.05,两样本均值差异无统计学意义。
        2.2未加甲苯放置室温24h后测定与新鲜标本比较，P<0.01,两样本均值有显著性差异。
      
3  讨论
        3.1尿液检查无创伤性并方便大量采集,有助于早发现、早诊断肾脏疾病以及对其治疗进行随访,故能广泛应用于肾脏疾病的诊断和治疗[1]。有意义的蛋白尿是指成人每天超过300mg，尿蛋白检测是慢性肾脏疾病诊断和观察的重要方法[2]，24h尿蛋白的测定适合不同性别、不同年龄、不同尿量的人群的肾脏疾病的评价。而24h尿蛋白一直是诊断病理性蛋白尿的“金标准”。
        3.2测定尿蛋白的方法很多，定性的有尿液分析仪和磺柳酸法等，定量的有微量考马斯亮蓝G-250显色法，双缩脲法及干化学仪器测定等。临床上常用二甲苯作为24h尿蛋白的防腐剂。用强生VITROS 950干化学分析仪检测24h尿蛋白时，说明书上明确说明不能使用尿液防腐剂。由于夏季天气炎热有利于细菌的繁殖，如果不添加防腐剂，细菌繁殖分解尿液中的蛋白质，从而使测定的蛋白浓度远远低于实际值。
        3.3 本实验中添加了二甲苯到尿液中检测尿蛋白与新鲜时对照，使用配对样本的t检验可以得出两组数据没有显著性的差异（P>0.05），从而得出添加了二甲苯到尿液中检测24h尿蛋白对结果没有影响。
        3.4 而对不添加防腐剂尿液标本，蛋白的浓度会明显降低（P<0.01），对结果影响明显，不利于对肾脏病人的评价与预后，所以24h尿蛋白测定时必须添加尿液防腐剂。
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4  结论
        本实验通过对模拟现实条件对尿蛋白的定量测定，以新鲜尿液测定数值作为对照，使用强生VITROS 950干化学分析仪测定尿液未加防腐剂与加防腐剂的尿液的蛋白浓度。通过对其进行统计学分析，添加二甲苯到尿液中对测定尿蛋白没有显著性影响，而不添加防腐剂的尿液中蛋白的含量显著性降低。本实验证明二甲苯对强生VITROS 950干化学分析仪测定尿蛋白没有统计学上的