pH值对尿液蛋白定性及定量检测的影响

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贾宁人 赵水娣  

蛋白尿是肾脏疾病最常见的表现之一 ［1，2］ 。尿蛋白检测在临床、科研及动物模型实验中常常被用到，用于辅助诊断蛋白尿的最常用的检测方法是尿蛋白定性及定量试验。虽然尿蛋白定性及定量试验价廉而无创伤性，并能提供许多信息而具有特定的临床实用价值，但由于尿蛋白组成在临床不同个体及疾病所处的不同阶段变化较大，而目前常用的尿蛋白定性及定量方法的准确性受蛋白组成的影响 ［2］ ，且受尿液理化性质的影响较大 ［3，4］ ，故在实际应用过程中应予注意。本文仅就笔者在临床、科研工作中对尿蛋白定性及定量试验遇到的一些问题做一探讨。

1 材料与方法
   
1.1 高pH值人尿标本 来源于本院肾内科住院患者，留取清洁中段晨尿20～50ml于带盖的一次性塑料样本采集杯内。
1.2 高pH值大鼠尿标本 来源于本院肾内科所做的实验动物模型大鼠的尿标本，收集12h夜尿标本于一次性塑料样本采集管内。

1.3 尿液干式化学试剂带 采用中国长春迪瑞实业有限公司H11-Ⅱ尿液分析试纸条（吉药管械（准）字2002第2400002号，批号20030923）。

1.4 尿总蛋白定量测试盒 采用英国RANDOX测试盒联苯三酚红染料结合法及全自动生化分析仪定量测定尿总蛋白。
   
2 结果
   
2.1 尿液pH值对干化学试剂带蛋白定性的影响 取1份蛋白定量为2.279g/L高pH值尿液标本加到5支清洁干燥的玻璃试管各约2ml，用微量分析纯级浓盐酸调整尿液的pH值使呈高低不同的pH尿，用干式化学试剂带定性测定尿液的蛋白含量，结果见表1。
   
表1 尿液pH值对干化学试剂带蛋白定性的影响 略
   
2.2 尿液pH值对联苯三酚红染料结合法全自动生化分析仪定量测定尿总蛋白的影响 取1份蛋白尿标本加到5支清洁干燥的玻璃试管各约2ml，用微量分析纯级浓盐酸调整尿液的pH值使呈高低不同的pH尿，用联苯三酚红染料结合法全自动生化分析仪定量测定尿总蛋白，结果见表2。
   
表2 尿液pH值对联苯三酚红染料结合法全自动生化分析仪定量测定尿总蛋白的影响 （略）
   
2.3 碱性尿与微酸性尿对蛋白定性及定量的比较 收集32份pH≥8.5大鼠尿标本，用微量分析纯级浓盐酸调整尿 液的pH值使呈微酸性（pH值接近6.5），分别做pH值调整前后尿液的蛋白定性及定量测定，结果pH值调整前尿液的蛋白定性结果均为强阳性（++++），调整后仅4例尿液的蛋白定性结果为阳性（+～++），结果28例强阳性（++++）尿液蛋白定性转阴性，4例蛋白定性阳性尿液的结果也非强阳性。而pH值调整前后尿液的蛋白定量结果经配对t检验，t=1.296，P>0.2，pH值调整前后尿液的蛋白定量测定结果差异无显著性，pH值调整前后尿液的蛋白定量测定结果相关系数r=0.9774，t  r =11.5299，P<0.001，Y 后 =0.192+0.892X 前 。

3 讨论
   
3.1 尿液的pH值对干化学试剂带蛋白定性法的测定结果影响很大。尿液在微酸性环境下，用干化学试剂带做尿液蛋白定性测定结果准确。若尿液偏碱性，会出现测定结果的假阳性或阳性结果程度增加，这种情况在医学科研的动物模型大鼠尿液检测中尤其易出现，因为绝大多数大鼠尿液呈较强的碱性。反之，若尿液偏酸性，会出现测定结果的假阴性或阳性结果程度减弱。结果与杜忠斌报道的结果基本一致 ［3］ ，但pH<5.5时我们观察到测定结果阳性结果程度减弱。

3.2 尿液的pH值对联苯三酚红染料结合法全自动生化分析仪定量测定尿总蛋白的影响很小。只有当尿液的pH<4.5时，尿液蛋白定量结果才出现明显的负偏差，而尿液的pH<4.5情况在临床上是几乎不会出现的。而尿液偏碱性不会对尿液蛋白定量结果造成偏差。

3.3 尿液的蛋白定量测定才能真正反映尿液中的蛋白排出量。蛋白定性结果只能作为尿液蛋白测定的过筛试验，且测定时应严格控制尿液的pH值，测定时若发现为碱性尿或酸性尿应调整pH值到微酸性重新测定后报告结果。

3.4 染料结合法是目前临床、科研中普遍使用的尿蛋白定量的方法，但方法受蛋白成分的影响，检测结果往往偏低，而双缩脲法基本不受蛋白成分影响，要准确测定尿蛋白总量最好选择双缩脲法。

3.5 尿中特殊蛋白成分定量分析可帮助分析蛋白尿性质，诸如β 2 微球蛋白、微量白蛋白、各种免疫球蛋白及补体成分等定量检测对判断疾病性质、病程、治疗及预后均有一定意义，在总蛋白定量同时定量测定特殊蛋白成分更有临床价值。  

【参考文献】
   
1 熊立凡，金大鸣，胡晓波.现代一般检验与临床实践.上海:上海科学技术文献出版社，1998，104.
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2 姜傥.尿液蛋白与肾脏病.中华检验医学杂志，2002，25（5）:312-313.

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