尿液诊断膀胱癌的研究进展

枫叶

1. 简 介
      膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，在我国每年有约15万的膀胱癌新发病例，而且发病率呈逐年增高之势。由于全部尿路从肾盏、肾盂、输尿管、膀胱及前列腺和尿道均为移行上皮所覆盖，所以90 %以上是移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma, TCC)，少数为鳞癌和腺癌。移行细胞癌患者中近30％初诊时已有肌层浸润，其余70％为浅表性膀胱癌；虽采用经尿道切除和膀胱腔内辅助治疗可获得良好效果，但复发率高达50％～70％，而且10％～15％的复发肿瘤侵及肌层，有时复发会在术后数年发生。因此，早期诊断和长期复查监测非常必要[1]。
膀胱癌诊断和筛查的主要手段是膀胱镜下活检和尿细胞学检查。虽然膀胱镜是诊断复发性尿路上皮癌的金标准，但是具有侵入性，且对于微小病变和原位癌不易辨认。尿脱落细胞病理学检查虽然无创伤，然而阳性率仅为8 %～46 %，尤其在检测低级别肿瘤时敏感度更低, 而且结果判断具有主观性，容易产生偏差。另外，感染、结石等亦可影响细胞的形态而造成假阳性[2]。鉴于尿细胞学和膀胱镜检查存在的种种缺陷，尿液诊断膀胱癌一直是研究热点并取得了一定的成果。

2.获FDA批准的膀胱癌尿液检测方法

获FDA(美国食品和药品管理局)批准的膀胱癌尿液检测方法迄今只有尿核基质蛋白22、膀胱肿瘤抗原（BTA）、免疫细胞检查法( ImmunoCyt) 、纤维素和纤维蛋白原降解产物及荧光原位杂交（FISH）5项。上述方法除FISH以外均已应用多年，但和FISH一样都存在敏感度和特异度不足的问题，只能作为细胞学和膀胱镜检查的补充，无法替代[3]。

2.1 核基质蛋白22（NMP22）
NMP22是组成细胞核内部结构的支架,而且同DNA复制、RNA合成、激素联接、基因表达调控密切相关。作为一种核有丝分裂器蛋白，NMP22在分裂间期含量很少。膀胱癌时大量肿瘤细胞凋亡并将NMP22释放入尿，使其水平可增高25 倍。以10 kU/ mL为临界时，它对膀胱癌诊断的敏感度为69.7 %，特异度为78.5 %，对浸润性膀胱癌诊断的敏感度为100 %[4]。但膀胱癌患者尿中NMP22 水平增高，与肿瘤的分级、分期不相关。尽管NMP22的敏感度较细胞学检查高很多，但研究证实在有膀胱炎症和其他肿瘤如肾细胞癌存在时，NMP22水平也升高，因此对于已经确诊为膀胱癌的病人来说，NMP22显得更精确一些。

2.2 膀胱肿瘤抗原(BTA)
BTA是膀胱肿瘤在浸润和生长过程中释放的蛋白水解酶降解基底膜的各种成分形成的胶原片段、糖蛋白、蛋白多糖等释放进入膀胱腔内形成的复合物。单抗免疫分析法BTA - stat检测敏感度67 %～87 % ,对于膀胱移行细胞癌（BTCC）术后随访肿瘤的特异度49 %～70 %[4] ,可用于BTCC 的筛查。由于敏感度特异度偏低，近年已逐渐被其他方法所取代。

2.3 免疫细胞学检测
免疫细胞学检测是细胞学和免疫荧光的结合，即用单克隆荧光抗体检测膀胱癌脱落细胞的特异性分子标志物。总体敏感度和特异度一般，约为86％和79.4%[2]，而且需要专门的实验室和培训技术人员，应用面不广。

2.4 纤维素/纤维蛋白原降解产物
纤维素/纤维蛋白原降解产物是由纤溶酶作用于纤维素和纤维蛋白原后所产生的蛋白质片段。膀胱肿瘤细胞产生的血管内皮生长因子能够增加微小血管的通透性，从而引起血浆蛋白漏出。凝血因子快速将纤维蛋白原转化为纤维素，然后再被纤溶酶进一步降解成纤维素降解产物（FDP）。目前常用的Colorimetric FDP 实验简单快速诊断膀胱癌总的敏感度82.1 %，Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级TCC 的敏感度分别为63.2 %、88.2 %和95 %。对于健康者,其他尿路疾患和膀胱镜检未见异常的TCC 复查者,其特异度别为96 %、86 %和80 %[5]。但在前列腺癌、膀胱炎症，尤其是肾盂肾炎的病人，FDP实验很容易出现假阳性。

2.5 荧光原位杂交
荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization ,FISH)是用荧光标记的核酸探针和中期或间期细胞DNA杂交，检测DNA 序列及其变化的方法。具有快速、无创性、敏感度高和特异度强等优点。
<P>膀胱癌细胞易发生非随机的染色体改变，包括结构畸变和染色体数目异常。常见结构畸变染色体有3、9、1、5、11 、21 、17 ，染色体数目异常有3、9、7、10 、11 、Y、1、8、17 、15 [6]。临床研究发现9 号染色体部分或全部丢失在膀胱肿瘤中最常见，超过50 %膀胱癌患者有此染色体改变，被认为是肿瘤发生的早期事件和关键步骤；其次是17 号染色体畸变，可能与肿瘤浸润行为有关，因为有17号染色体非整倍体的肿瘤具有更高复发率和浸润性；7号染色体畸形也常见于膀胱癌，以三倍体多见，也可有四倍体(约占38 %)，它