医站点医维基

医疗之家-医疗器械-医疗设备-医疗技术

 找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

扫一扫,访问微社区

查看: 6317|回复: 1

[生化检验] 生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

[复制链接]

87

主题

87

帖子

273

积分

中级会员

Rank: 3Rank: 3

积分
273
QQ
发表于 2018-2-23 15:38:20 | 显示全部楼层 |阅读模式
可能很多朋友一看到反应曲线这四个字的时候,都有一种抗拒心理,觉得这个太难了,看不懂。其实吧,看懂生化反应曲线没想象中的那么难。

1.反应曲线是什么?

炒菜,应该大家都会吧?其实,生化项目的检测过程跟炒菜比较相似,炒菜的基本流程是:放油→放菜→放盐,如果每隔18秒,对菜的味道进行打分并记录,再把各个点连接绘成一条曲线的话,炒菜的反应曲线大致是这样的,见下图:


生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


如果只是把油→菜→盐,按顺序放进锅里,这一锅菜应该是没法吃的,对吧?至少得在放油、菜、盐的时候用锅铲搅拌混匀一下,对吧?于是炒菜的反应曲线变成了这样,见下图:

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


那么,对应的生化项目检测(以奥林巴斯AU系列为例)是这样的:首先,仪器会向反应杯加入试剂1(R1),紧接着加入样本(S), 搅拌混匀,3分钟后加入试剂2(R2),搅拌混匀。在这个过程中,仪器会每隔18秒测试一次吸光度并记录,总共28(0-27)个点,然后连接成线,就是我们所看到的反应曲线,见下图:

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


所以,反应曲线是项目检测整个过程的记录,相当于是一个静态的录像。

2.反应曲线怎么看?


在整个检测过程中,试剂1(R1)、样本(S)、试剂2(R2)加入以及搅拌的时间点都是固定的。我们知道了反应曲线是怎么来的之后,需要知道什么样的曲线算正常。

一般正常的反应曲线:a.比较平滑,无明显的跳点;b.加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度样本除外);c.终点法的反应曲线,会有一段曲线的吸光度基本无变化;d.速率法的反应曲线,基本成一条直线(两点速率法除外)。

生化的反应曲线可以分为终点法和速率法两大类,以下列举了一些正常的反应曲线供参考:

1)        终点法的反应曲线:
反应到达终点后反应混合物的吸光度不再变化(R1主要用于消除干扰,R2加入之后,反应启动),就像你炒好的菜在一段时间内味道是不变的。如下图:

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


2)        速率法的反应曲线:
随着反应的进行,吸光度越来越大,但速率保持不变,R2之后基本成一条直线,无明显跳点(两点速率法除外),如下图:

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

注:上图在加入R2之前为虚线,是因为R1+S的体积小于仪器要求的最低的反应总体积。

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!

生化结果出现负值怎么办之二:简单读懂反应曲线!


我们在看反应曲线的时候,眼里是一条曲线,脑袋里面浮现的应该是整个的检测过程,去还原仪器的动作,分析从什么时候吸光度突然变得异常。你可以想象成这盘菜是怎么炒出来的。

3.反应曲线有什么用,什么时候用得着?


1)结果出现负值(终点法项目):
a.反应曲线有可能是一条直线,样本或R2有可能没有加入;
b. R2加入之前的吸光度比加入后还高,试剂1和试剂2位置放反或者严重脂血标本。可结合前一篇文章一起看:生化结果为什么会出现负值?出现负值了怎么办?。

2)结果明显偏低(速率法项目):反应曲线可能变成了类似于终点法的曲线,也就是我们通常说的底物耗尽,需要稀释重测。

3)试剂过期或污染、搅拌棒破损、携带污染以及冲洗站滴水也会在反应曲线上有所体现。

4)总之,在结果比较可疑的情况下,可以调出反应曲线看看是否正常,有助于找出问题所在。

4.注意事项:

1)不同厂家或型号的仪器,加入样本和试剂的顺序可能不同,比如,日立是S+R1+R2。

2)部分仪器横坐标是直接用时间表示,比如贝克曼LX/Dxc系列用的是秒,另外LX/Dxc系列的加样顺序有可能是R1+S+R2或者R1+R2+S。

3)部分仪器没有把各个点连接起来,所以看到的是由点组成的曲线。

4)看反应曲线时,注意纵坐标的刻度,就像远看是美女,近看就不一定了。

5)反应曲线界面还可以看到很多的信息,比如:光电校正、试剂空白、定标的时间以及每一点的吸光度,这些都会有助于判断结果异常的原因。所以,你应该已经意识到,当有人问为什么某项目的结果偏低、不正常时,仅凭一个结果是很难判断的。

5.其他:

临床医生在诊断病情时一般会参考各科的检验报告单,反应曲线相当于是检验科判断结果准确性的“检验报告单”。在遇到可疑的结果时,建议大家调出反应曲线看看。另外,其他仪器也有类似的功能,比如:糖化有层析图,血球仪有散点图等。希望大家能够用好各种仪器提供的“检验报告单”,提高工作效率。


【本文系作者燕子李三授权检验视界网发表,并经检验视界网编辑,转载请注明作者、出处和本文链接

<div class="keytags">关键词:生化反应曲线吸光度速率法终点法
回复

使用道具 举报

1

主题

395

帖子

807

积分

高级会员

Rank: 4

积分
807

最佳新人

发表于 2018-9-3 21:51:48 | 显示全部楼层
回复 支持 反对

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

QQ|关于我们|医维基|网站地图|Archiver|手机版|医疗之家 ( 沪ICP备15050839号|申请友情链接  

GMT+8, 2019-9-16 02:51 , Processed in 0.329048 second(s), 33 queries .

Powered by Discuz! X3.2 Licensed

© 2001-2013 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表