XE

亮仔

作者：四川大学华西医院实验医学科临检血液室  韩秀华，曾素根，谢恒，金咏梅，毛志刚，庄利芳，朱新勤，郭曼英，弥艾莉
  

  XE-2100五分类血细胞分析仪已被临床实验室广泛应用，有取代三分群仪器的趋势。仪器结构较复杂，有四个检测模式，即手动模式(Manual Mode)、自动进样模式(Sampler Mode)、手动闭盖模式(Manual Closed Mode)和毛细管血模式(Capillary Mode)等，检测的参数多，包括全血细胞计数(complete blood count，CBC)、五分类(DIFF)和网织红细胞(reticulocyte，RET)等分析。其中CBC包括有白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)等参数；DIFF 包括中性粒细胞(NEUT)、淋巴细胞(LYMPH)、单核细胞(MONO)、嗜酸性粒细胞(EO)、嗜碱性粒细胞(BAS0)等。
  

  目前只有CBC有商品校准品(SCS-1000)，而DIFF和RET还没有商品校准品，每次要通过手工计数来定值。因此该类血细胞分析仪的校准远比其它仪器复杂，就我室XE-2100五分类仪器的校准中值得注意的问题介绍如下。
  

  1 人员培训及能力评估  必须对参加血细胞分析仪校准的人员进行培训，要求责任心强，有丰富工作经验、高素质的工作人员和工程师参加，并相对固定。培训内容主要包括仪器的准确使用、校准品的正确使用、手工分类白细胞的正确方法、手工计数RET(网织红细胞)的正确方法等，经考核达到要求方可上岗。
  

  2 制定标准操作程序(Standard Operating Procedure，SOP)   参照仪器说明书、校准品说明书制定出仪器校准的操作步骤。如果使用定值的新鲜全血，还应把新鲜全血的采集、对新鲜全血的要求、定值方法和步骤等写进SOP。要求标准而详细的操作步骤，并严格按照SOP的要求一步一步操作。
  

  3 血细胞分析仪校准频率  新仪器在使用前；旧仪器在大维修后；质控失控排除试剂、质控品原因的情况下；更换试剂供应商(但所有试剂必须由一个供应商提供)；至少每半年校准一次等。
  

  4 校准品来源  CBC校准品：具有溯源性的商品校准品(如Sysmex SCS-1000)或新鲜全血。新鲜全血DIFF的定值问题：CAP要求用手工方法对DIFF(包括BASO％，NEUT％ ，LYMPH％ ，MONO％ ，EO％)定值，其方法必须采用双盲法，DIFF分类计数200个白细胞，且每人之间的分类结果，必须在可接受的范围(可通过标准误计算和判断：例：分类结果30％，=0．0324，SEp=2×0．0324=6．5 ，范围为：30%士6.5%)。新鲜全血RET定值的问题：CAP要求用流式细胞或手工方法对RET定值，如果用手工方法，至少由两个以上有经验的人员使用煌焦油兰染色后，计数1 000个红细胞中的RET数，计算均值作为靶值。
  

  5 仪器校准前准备  仪器的功能鉴定，应由仪器工程师来完成对仪器进行一系列的检查和维护保养(旧仪器)，并出具其功能鉴定的相应报告，以XE-2100为例，功能鉴定主要包括：压缩机单元、主机单元气路系统、主机单元调整、常规保养等。仪器空白计数、携带污染、精密度等，按照仪器说明书的要求进行操做和判断，符合要求后再对仪器进行校准，否则由工程师处理，达到要求为止。
  

  6 同一仪器的不同检测模式的校准  如果同一仪器的不同检测模式均应用于临床标本的检测，必须同时对各检测模式进行校准。
  

  7 校准系数变化分析  每次校准结束，对各参数校准系数的变化进行回顾和分析，了解仪器的状态。我室在2006年~2009年间，XE-2100(A)血细胞分析仪手动和自动检测模式CBC校准系数变化图(见图1，图2)，从图1和图2可以看出，在四年问不同参数的校准系数变化不同，HGB和HCT 校准系数变化较小，其次是RBC，变化最大的是PLT；不同检测模式的各参数的校准系数变化也不相同。但所有参数的校准系数变化均在可接受的范围内。
  

  

  8 关于校准验证和校准后新鲜全血比对  如果对仪器的校准系数进行了修改，不仅要用校准品进行验证，而且还要求在校准结束后，在检测临床标本前，用质控品进行再次验证，使每个参数均在控；同时进行新鲜全血比对，使各仪器问和同一仪器的各检测模式问的结果保持一致。
  

  血细胞分析仪的校准对于各实验室来说，是一件既十分重要又很平常的工作，但要做好确实很难，工作量相当大和繁琐。我们室共有6台(4台XE-2100和2台XS-1000i)五分类的血细胞分析仪，对每台仪器的不同检测模式进行校准，使各检测模式的各参数结果都准确可靠，并且一致性较好，并非一件容易的事情。如果同一实验室，使用不同生产厂商的仪器，这会给校正带来更大的难度，故最好购买同一厂家的仪器。
  

  近几年，我们严格按照CAP的要求对血细胞分析仪进行校准，通过我们的不懈努力，积累了一些经验，总结出值得注意的一些问题供探讨，使血细胞分析仪的校准科学、合理、实用。