全自动免疫印迹检测系统在过敏原检测中的应用

金光

1、简介
       

        过敏原的体外诊断一般是通过本地的抗原提取物来进行检测的，但是最近几年，基于单个纯化的过敏原组分(single purified allergen components，SPAC)IgE抗体检测技术已得到很好的发展，这种新的过敏原检测方法更容易进行标准化操作，并且能提供更多可靠的检测信息供临床参考。最具代表性的方法是EUROIMMUN的EUROLINE技术，这是一种可以同时检测多种抗体的多参数免疫印迹检测技术，在单一膜条上面，可包被针对特定IgE抗体的54种不同抗原，并同时出具相应的抗体检测结果。EUROLINE技术的全自动标准化操作平台即是EUROBlotOne全自动免疫印迹检测系统，实现从导入工作列表、血清标本加样、温育、清洗、成像及结果分析的封闭印迹检测所有过程的自动化操作，全部流程无人工干预，实现过敏原检测的全自动标准化操作。在结果的分析中，EUROBlotOne能识别抗原的类别，给出对应的抗体浓度，并按EAST国际分级标准，自动计算出过敏原抗体检测结果，方便临床的诊断与治疗。本次研究的目的是探讨EUROBlotOne在过敏原多参数检测项目中的性能表现，供临床检测实验室应用参考。
       

        2、方法
       

        检测结果标准：EAST国际分级标准；
       

        检测项目：
       

        重组的桦木花粉抗原条带(Bet v1， Betv2， Bet v4， 和Bet v6)；
       

        重组的梯牧草花粉抗原条带(Phl p1， Phl p5， Phl p7 和 Phl p12)
       

        血清：对桦木和梯牧草花粉都过敏的44份病人血清
       

        检测设备：EUROBlotOne全自动免疫印迹检测系统(以下简称EBO系统)；某过敏原检测系统（行业内公认的过敏原血清学检测金标准）(以下简称CAP系统)；
       

        检测目的：对比EBO系统与CAP系统的检测相关性，进而分析EBO系统的性能表现。
       

        3、检测结果
       

        EBO系统与CAP系统的检测结果相关性很好。
       

        桦木花粉检测(Bet v1， Betv2， Bet v4， 和Bet v6)的相关性为95%-100%，见图1所示：
       

       

       

梯牧草花粉检测(Phl p1， Phl p5， Phl p7 和 Phl p12)的相关性为95%-98%，见图2所示：

       

       

        同时使用这44份标本进行EBO系统检测与手工操作检测结果的相关性比对试验，图3是针对所有的484个抗体检测EAST分级结果的一致性分析：
       

       

       

        4、结论
       

        通过以上研究数据可以看出，EBO系统与CAP系统检测结果有非常高的相关性，结果稳定并且准确。借助EUROBlotOne的全自动无人值守操作，可以在4小时左右得到1584个特异性IgE抗体检测批量结果(见图4所示)。因此EUROBlotOne全自动检测系统在过敏原血清学多参数检测中是一个非常有价值的工具，值得大面积推广与应用。
       

       

       

        欧蒙医学诊断（中国）有限公司 供稿