人类免疫缺陷病毒抗体快速检测试剂的临床评价

山泉

                                                                                               李秀华1  许四宏1  李敬云2  貌盼勇3  王佑春1
              1中国药品生物制品检定所；2中国人民解放军艾滋病检测确认实验室；3解放军第三0二医院病毒科
       【摘要】目的  评价人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体快速检测试剂检测全血、血清或血浆样品中HIV抗体的敏感性以及特异性。方法  从不同地区以及不同人群中收集全血样品493例，并分离血浆，用考核试剂分别检测同一人的全血和血浆样品；同时从不同地区以及不同人群中收集HIV抗体阳性和阴性血清/血浆样品共1175份，用考核试剂和参比试剂同时检测。结果  考核试剂检测493份全血和血浆样品的结果一致，HIV抗体阳性者为99份；与参比试剂相比，考核试剂检测血清/血浆样品的敏感性为100%(367/367)，特异性为99.92%(1300/1301)。结论  该考核试剂与参比试剂的质量相当。
       【关键词】人类免疫缺陷病毒；抗体；诊断试剂

       HIV抗体快速检测试剂是以胶体金或硒为标记物、以硝酸纤维素膜为载体、以层析形式进行固相免疫测定的技术为原理而制备的[1]。由于该类试剂敏感性较酶联免疫试剂偏低，其使用范围受到限制 [2-5]。但该类试剂也有明显的优点，即试剂比较稳定，可以在室温条件下保存一年或更长的时间。具有操作简单、快速等优点，不需要仪器设备，尤其适用于单份样品的测定。已获准上市的产品主要是用于检测血清和血浆样品。上海中信亚特斯诊断试剂有限公司生产的快速检测试剂不仅可以检测血清和血浆样品，而且也可以检测全血样品。本研究的目的是对该试剂检测全血、血清和血浆样品中HIV抗体的敏感性和特异性进行临床评价。现将结果报道如下。
一．材料和方法
1．考核试剂
       考核试剂由上海中信亚特斯诊断试剂有限公司采用免疫层析法原理以及胶体金标记技术制备的，用于快速检测全血、血清和血浆样品中的HIV-1型和2型抗体。试剂所用抗原为基因重组的HIV-1 gp41和HIV-2 gp36。
2．参比试剂及其他试剂
       作参比试剂为人类免疫缺陷病毒抗体快速检测试剂Determine HIV-1/2试剂(雅培制药有限公司)；HIV抗体酶联免疫检测试剂为荷兰生物梅里埃公司生产；HIV抗体确认试为HIV Blot 2.2(新加坡GeneLabs公司)；丙型肝炎病毒抗体试剂盒为北京科卫试剂公司生产。
3．考核样品
       全血样品共493份，其中，自然人群全血样品195份采集于河北省，吸毒人群全血样品298份采集于四川省；用HIV抗体酶联免疫试剂初筛阳性且经确认试剂确认为阳性样品265份，其中163份为中检所实验室保存样品，102份为中国人民解放军艾滋病检测确认实验室保存样品；HIV抗体阴性血浆样品292份，其中283份为中检所实验室保存样品，9份为中国人民解放军艾滋病检测确认实验室保存样品；无偿献血员样品500份来自于北京红十字血液中心；丙型肝炎患者血清样品118份来自于解放军302医院病毒研究室，其HCV抗体为阳性。
4．评价方法
       所有试剂的操作均按说明书的要求进行。对全血样品，首先用考核试剂对全血进行检测，然后将全血样品离心取上清后，再分别用考核试剂、HIV抗体酶联免疫试剂、雅培Determine HIV 1/2参比试剂进行平行检测。对血浆样品分别用考核试剂和参比试剂进行检测。对检测不一致的样品用确认试剂进行确认检测；
5．结果判定及分析
       所有检测结果均以各试剂说明书的要求进行判断。分析考核试剂检测全血样品与血浆样品的特异性和敏感性有无差异；分析考核试剂与参比试剂检测血清或血浆样品的特异性和敏感性有无差异。
二．结果
1．全血与血浆样品的检测结果比较
       考核试剂检测493份全血和血清的结果一致，其中检出99份为HIV抗体阳性反应，394份为HIV抗体阴性反应。参比试剂检测血清的结果显示，98份为HIV抗体阳性，395份为HIV抗体阴性(表1)。考核试剂与参比试剂的总符合率为99.80%。对参比试剂检测为阴性但考核试剂检测为阳性的1份样品用HIV抗体酶联免疫试剂进行检测，为HIV抗体阴性，同时经确认试剂检测，结果显示仅有p24抗体一条带型，判为HIV抗体不确定样品。

2．对实验室保存的血浆样品的检测
       对中检所保存的163份HIV抗体确认阳性样品和283份HIV抗体阴性样品，中国人民解放军艾滋病检测确认实验室保存的102份HIV抗体确认阳性样品和9份阴性样品，用参比试剂和考核试剂平行检测，结果显示两种试剂的检测结果完全符合，符合率为100%(表2)。

3．献血员血浆样品的检测
       北京地区献血人群500份样品，经HIV抗体EIA试剂和HIV抗体确认试剂检测，结果4份样品(保存样品)为HIV抗体阳性，496份样品为HIV抗体阴性。经考核试剂和参比试剂平行检测，结果4份HIV抗体阳性样品，考核试剂和参比试剂均检测为阳性，496份HIV抗体阴性样品均检测为阴性，考核试剂与参比试剂的符合率为100%。
4．HCV抗体阳性样品的检测
       118份抗HCV抗体阳性(HIV抗体阴性)样品，经考核试剂和参比试剂平行检测，结果均为阴性，两者的符合率为100%。

三．讨论

       被考核试剂为胶体金类快速诊断试剂，目前主要用于流动献血员现场HIV抗体初筛以及急症病人急症手术前的HIV抗体筛查，该试剂即可检测血清或血浆样品，也可检测全血样品。在考核过程中，一般采用已批准上市的同类试剂作为参比，分析考核试剂与参比试剂在检测相同临床样品时的敏感性和特异性的差异。目前国内已批准数家快速检测血清和血浆样品中HIV抗体的同类试剂，但无检测全血样品中HIV抗体的快速检测试剂。因此，在考核过程中，用考核试剂分别检测同一人的全血和血清或血浆样品进行该试剂的自身对照，分析该试剂检测全血和检测血清或血浆样品在敏感性和特异性方面有无差异。然后再用参比试剂同时检测血清和血浆样品，分析其敏感性和特异性。考核结果显示考核试剂检测全血与检测血浆样品的结果一致，而且与参比试剂相比，考核试剂的特异性为99.92%(1300/1301)，敏感性为100%(367/367) 。说明考核试剂与参比试剂相比其敏感性和特异性无明显差别，但考核试剂可以检测全血样品，在实际应用中可能更简便。

【参考文献】
1． 李秀华，宋爱京，王佑春．HIV抗体快速检测试剂的临床评价．中华实验和临床病毒学杂志，2006，20：279-281
2． 李秀华，宋爱京，王佑春．HIV抗体快速诊断试剂与酶联免疫诊断试剂灵敏度的比较．中国生物制品学杂志，2004，17：175．177
3． Apetrei C，Loussert—Ajaka I，Descamps D，et al．Lack of screening test sensitivity during HIV I non。subtype B seroconversion．AIDS 1996，10：F57-60
4． Arai H，Petchclai B，Khupulsup K，et a1．Evalumion of a rapid immunochromatographic test for detection of antibodies to human immunodeficiency virus．J Clin Microbiol，1999，37：367-370
5． HolguinA．Evaluationofthree rapidtestsfordetection ofantibodiestoHIV-1 non-B subtypes，JVirolMeth，2004，115：105-107

                                                                                                        编辑：范伟伟