临床生化诊断试剂盒的选择

想望

试剂盒的性能指标
（一）准确度
       通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断。
       1．回收试验 回收率越接近100%，准确率越高，一般以100%±5%为合格。
       2．定值血清的测定 对于某些无法准确加入标准物的试剂盒，可用低、中、高浓度的定值血清进行测定，测得值符合定值血清的靶值范围（X ±2S）为合格。
       3．对照试验 将被检试剂盒与公认的参考方法同时测定若干样本（一般要求100 份，最少需30 份），计算两组结果的相关系数和直线回归方程。相关系数 γ 越接近1.0、斜率b 越接近1.0，截距a 越接近0，则准确度越高。相关系数要求在0.9～1.0 之间，γ 值符合要求不等于准确度都符合要求。b 表示比例偏差，a 表示恒定偏差。（1-b）×100%表示比例偏差的大小。（a 值/样品含量）×100%表示恒定偏差的大小。
       4．非特异性与干扰试验 对维生素C、黄疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度，干扰值越小越好。
（二）精密度
       试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求。
       1．瓶间差异 同一试剂盒，取10 瓶试剂复溶，测定同一样品的含量，求平均值、标准差、变异系数。
       2．批内精密度 同一样品用同一瓶试剂测定10 次，求平均值、标准差、变异系数。
       3．批间差异 同一样品，用不同批号的10 瓶试剂测定，求平均值、标准差、变异系数。
（三）线性范围
       指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。被检样品的含量超出测定线性范围，必须改变样品与试剂体积的比例，重新测定才能得到准确结果。试剂盒的测定线性范围是衡量试剂盒质量的一个指标，也是正确使用该试剂盒的关键之一。试剂盒测定线性范围要求能覆盖该项测定的常见医学决定水平。测定线性范围太窄时，常规工作中需调整标本量，重做的标本多，造成人力、物力、财力和时间的浪费。测定线性范围也不必过大，否则，成本高，价格贵，原材料浪费。
       观察试剂盒的测定线性范围时，应用真实标本如定值血清或标准液操作，高浓度标本含量应超过说明书上规定线性上限的20%，整个线性需要五组不同的浓度，每组均需测定三次，并求平均值。
（四）抗干扰作用
       双试剂型试剂盒主要优点是抗干扰作用。如ALT 双试剂盒的第一试剂能排除内源性丙酮酸干扰。此种试剂盒的第一试剂加入被检血清后，37℃5 分钟内显示NADH 被消耗、340nm 吸光度值下降的曲线，当内源性丙酮酸被消耗完，吸光度曲线平坦，加入第二试剂后，340nm 吸光度立即上升，当ALT 酶促反应发生后又下降。这种反应曲线显示了ALT 双试剂具抗干扰作用。甘油三脂测定双试剂的排除游离甘油的作用，可加入甘油标准液后进行试验，以证实排除游离甘油的能力。
（五）灵敏度
       在终点法灵敏度以特定波长下1cm 光径时单位浓度的吸光度值表示，如胆固醇酶法测定试剂盒要求其灵敏度A500nm0.005 时的胆固醇浓度相当于0.08mmol/L。连续监测法以特定波长下1cm 光径单位酶活性的吸光度值表示，试剂盒质量合格时，其灵敏度值与理论计算的ΔA/min×因数值一致。试剂盒的质量与灵敏度密切相关，灵敏度达不到要求的试剂盒不宜使用。
（六）稳定性
       试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以下三种。
       1．原包装试剂的稳定性 按说明书的保存方法储藏，于不同时期取出一瓶复溶，测定试剂吸光度值、标准品含量、定值血清含量、线性范围、酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线及其他性能指标，直到这些指标变化超出规定值的10%以上的期限，为原包装试剂的稳定期。
       2．复溶后试剂的稳定性 将复溶试剂分别放在4℃、25℃保存，逐日与新复溶试剂对比，观察上述指标（见原包装试剂稳定性），直到测定结果与新复溶试剂的差值>10%以上，这一期限为复溶后试剂的稳定期。
       3．不同温度下的保存期 将原包装试剂盒置25℃、37℃、45℃、4℃保存，以出现说明试剂变质的指标来确定在不同温度下的保存期。
选购试剂盒的要求和注意事项
（一）选购试剂盒的一般要求
       1．所采用的测定方法特异性好，灵敏度、准确度、精密度符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO 等推荐的方法性能。
       2．试剂盒的储存期至少为1 年。
       3．水溶性、低粘性、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、不污染环境。
       4．所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO 推荐的标准和要求。
（二）选购试剂盒的注意事项
       1．首先要仔细阅读试剂盒的说明书，对试剂盒选用方法有所了解，科学研究工作时应选择参考方法试剂盒，医疗预防工作应选择推荐的常规方法试剂盒，或选择公认的测定方法试剂盒。此外，对试剂盒的组成、方法性能指标加以分析，是用于手工操作，还是用于自动分析仪。属于后者，其实验参数是否与本单位自动分析仪的实验参数相符。
       2．有无卫生部的批准文号。凡已列入卫生部临床检验体外诊断试剂审批管理范围的试剂盒，没有生产批准文号的，不应使用。对有生产批准文号者，也需考察生产厂家的信誉。
       3．对试剂盒的包装、理学性能、方法学性能指标进行考察和检测，并经实际应用。符合说明书规定及本室实验要求者方可选购。
       4．根据本单位的日工作量、分析仪试剂用量、试剂复溶后4℃稳定期等因素综合分析，应选购合适包装，近期出厂的产品。
       5．注意季节对试剂质量的影响。一般在气温较低的季节购买试剂，防止试剂盒在运输途中变质。
       6．在确保试剂盒质量前提下，应选购价格低的产品。
                                                                                                            编辑：范伟伟