中性粒细胞VCS参数在血培养阴性感染性心内膜炎中的临床应用 ...

东方

      [摘要] 目的：探讨中性粒细胞VCS等参数在血培养阴性的感染性心内膜炎疾病中的变化及临床意义。方法：使用Beckman Coulter LH 750全自动血液分析仪对64例血培养阴性感染性心内膜炎患者，50例正常对照者进行常规血液分析。收集各组WBC总数及中性粒细胞VCS参数。对各组问均数进行t检验来判断差异有无统计学意义。结果：64例血培养阴性的感染性心内膜炎患者的WBC总数比正常对照组略高，差异有统计学意义(P<0．05)。中性粒细胞平均体积(MNV)和体积分布宽度(MNV-SD )均明显高于正常对照组，均差异有统计学意义(P<0．01或P<0．05)。中性粒细胞平均传导率(MNC)也高于正常对照组，差异有统计学意义(P<
0．05)。但中性粒细胞平均光散射(MNS)与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)。ROC曲线显示，血培养阴性的感染性心内膜炎患者的MNV的曲线面积达到0．879，MNC 的曲线面积达到0．756。在MNV≥140时，其敏感性和特异性分别为80%，82% 。结论：中性粒细胞VCS参数对血培养阴性的感染性心内膜炎有较好的早期诊断提示作用。
      [关键词] 感染性心内膜炎；血培养阴性；中性粒细胞；VCS

       LH 750全自动血液分析仪对血细胞不进行任何处理，使其在“自然状态”下使用电阻抗法测量细胞体积(V)，采用高频电磁探针(C)测量细胞内部结构(如：核浆比、核型等)，用激光散射(S)分析细胞内部颗粒物质的方法来区别不同类型细胞。并得到相应的VCS参数——平均体积、平均电导率和平均激光散射。感染性心内膜炎(IE)是由于心脏内膜表面被细菌感染所致，常累及心脏瓣膜。对于IE的临床诊断参照改良Duke标准：微生物培养(血培养)、超声心动图及病理学诊断为主要依据。虽然超声心动图是一个较为敏感的指标，但其特异性还不足以鉴别是血栓还是瓣膜病。病理学诊断是手术后确诊，缺乏预测性。所以微生物培养(血培养)对于IE的诊断是十分重要的指标，但对于血培养阴性的IE的诊断是相对较为困难的。本文使用VCS血细胞检测技术对64例血培养阴性IE患者的中性粒细胞参数进行测定和分析，以探讨其在血培养阴性IE患者诊断中的应用价值。
1 对象与方法
1.1 对象
       IE组：2007年1月~2009年1月在我院就诊的IE患者64例。均符合改良Duke诊断标准被确诊为IE。男29例，女35例；年龄8～69岁。正常对照组：均为在我院体检中心进行体检的人群，在近2周内无发热及感冒症状，并且胸片、B超、肝、肾功能结果均为正常者50例。男20例，女30例；年龄17～58岁。
1.2 仪器与试剂
       LH750全自动血液分析仪及配套试剂(美国Beckman Coulter公司)。5C全血质控品：Normal、Abnormal I、Abnormal II (均为美国Beckman Coulter公司)。Latron control校准品(美国Beckman Coulter公司)。Bactec 9050全自动血培养仪及配套血培养瓶(美国BD公司)。
1.3 方法
       抽取住院患者和体检者静脉血2ml 于EDTA—K2抗凝的真空管内，充分混匀。在2 h内完成血常规检测。在每日检测前仪器均测试本底(Back—ground)，并使用5C 质控品进行质量控制。每月使用标准乳胶颗粒(Latron control )调整激光。
       使用BD公司血培养瓶在24 h内分别从3个不同部位抽取患者血液做血培养，每次间隔时间应>1 h。培养24 h后若为阳性，则不再抽血。若为阴性，则再次抽取3次血培养送检(部位与第1次可相同也可不同)。培养5 d后无细菌生长则报告血培养阴性。
1.4 统计学分析
      所有数据使用SPSS 15．0统计软件，进行统计学分析。组间均数比对采用独立样本t检验。以P<0．05为差异有统计学意义。
2 结果
       64例血培养阴性IE患者与正常对照组的中性粒细胞VCS参数的比较见表1。

       血培养阴性IE患者中性粒细胞VCS参数ROC曲线见图1。

       从ROC曲线中发现，MNV 的曲线下面积最大，达到0．879，其次MNC 的面积为0．756，MNV-SD面积为0．709。
       VCS参数预测血培养阴性IE的敏感性和特异性见表2。

       当MNV≥140 fL时，其预测感染性心脏疾病的敏感性和特异性分别为80% 、82% ，高于MNC和MNV-SD项目对该疾病的预测值。

3 讨论
       临床上通常使用WBC总数、中性粒细胞比率及绝对值、中性粒细胞核左移的程度来判断感染性疾病。中性粒细胞在细菌感染时发挥出趋化、吞噬和胞内杀灭等非特异性免疫防护作用，并出现形态学上的变化，如中毒颗粒、空泡、Dohle小体及核型的改变(如核左移)，导致中性粒细胞VCS参数会发生相应的变化。

      IE是由于细菌在心内膜表面感染所致的感染性疾病。本次观察的64例血培养阴性的IE患者的MNV、MNV-SD 、MNC 均明显高于正常对照组，均差异有统计学意义(均P<0．05)。另外从ROC曲线中可以看出，MNV对预测感染性心内膜炎最敏感，曲线下面积达到0．879。当MNV≥140 fL时，其敏感性和特异性分别为80% ，82% 。以上改变均显示出在感染过程中，中性粒细胞体积增大，有不同程度的核左移，细胞大小不一致使体积分布宽度增大。这些炎性改变与国内外的报道相一致。但在本次观察的IE患者中，MNS项目(细胞内部颗粒物质)与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)。与某些国内外的文献报道不相符。我们认为中性粒细胞在感染过程中虽然会产生中毒颗粒、Dohle小体等胞内物质，但同时也会脱颗粒和释放某些炎性介质，如溶菌酶、趋化因子和乳铁蛋白等等，而且细胞体积增大也使胞内颗粒密度降低，致使激光散射项目(MNS)变化不大。
       血培养阳性是诊断IE的重要证据之一。但是血培养阴性的最主要原因是患者在就诊前服用抗生素，其次是某些苛养菌感染(如巴通氏体、鹦鹉热衣原体等) 。通过对本次研究的64例血培养阴性的IE患者的病史调查发现，患者在就诊前服用抗生素或在转入本院前经过抗菌治疗的有44例，占68．8% 。而其中的11例经病理学证实为抗菌治疗不彻底迁延为亚急性(慢性)IE。血培养阴性容易对该疾病的诊断产生延误，有研究表明：血培养阴性IE患者的临床表现(如发热、心脏杂音、脾大及血管变化)较血培养阳性的IE患者低，而且预后也较差。在本次的研究中还发现，血培养阴性的IE患者的WBC总数与正常对照组虽然差异有统计学意义，但相差较小(分别为7.03，6.19)，且均在正常范围内，更容易引起临床的忽略。虽然超声心动图是诊断IE较为灵敏的方法，但是其特异性在鉴别血栓和瓣膜病方面还是存在不足 。病理学诊断则是在手术后，缺乏前瞻性。但是中性粒细胞VCS参数中的MNV和MNC在血培养阴性的IE患者中有较高的敏感性，说明中性粒细胞VCS参数在WBC总数不高(<10．0×109／L)的感染性疾病患者中有较高的特异性，尤其是在当其他血液学指标与患者的临床症状与表现不一致时。
       中性粒细胞VCS参数是从血常规检测中获得的，无须另外检测，不会增加患者的负担，而且是仪器一次性检测超过8000个活性细胞所获，结果比人工镜检更精确。

                                                                                                           编辑：范伟伟