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想望

                                                                                刘常军1　刘婷2　董矜1　姜辉1　田亚平1
                                                                  1．中国人民解放军总医院生化科；2．吉林大学白求恩医学院
       【摘要】　目的　通过对ＵＦ-１０００ｉ尿沉渣分析仪假阳性结果进行分析，获得实验室工作中排除假阳性检测的经验和方法。方法   采用抽签法随机收取住院患者晨尿样本５００份，同时进行ＵＦ-１０００ｉ尿液沉渣流式自动分析仪（简称ＵＦ-１０００ｉ）、干化学和显微镜检测（镜检）。ＵＦ-１０００ｉ检测异常者为阳性，其中ＵＦ-１０００ｉ检测异常而干化学和镜检正常者为假阳性，将２者检测的有形成分结果进行分析。结果　５００份样本中，有１７８份阳性样本，其中有２０份样本ＵＦ-１０００ｉ的主要检测项目均出现假阳性，其中红细胞（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ，ＲＢＣ）、白细胞（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ，ＷＢＣ）、管型、上皮细胞（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ，ＥＣ）的假阳性率分别为１０．８％、８．２％、２３．１％、１４．３％。结论　ＵＦ-１０００ｉ尿沉渣分析仪提高了尿液分析的过筛检查实验室检测效率，但对其阳性结果还需密切注意，应该避免假阳性结果。
       【关键词】　ＵＦ-１０００ｉ尿沉渣分析仪；尿沉渣；假阳性

       近年来，随着科学技术的进步，用于尿液成分检查的方法和手段不断更新，尿沉渣分析仪现已成为临床实验室不可缺少的仪器之一。由于全自动尿沉渣分析仪具有操作规范化、检测速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点，广泛应用于临床。
       ＵＦ-１０００ｉ尿液有形成分分析仪能快速筛选异常样本，并对红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌等主要参数进行定量报告，可将结晶、类酵母细胞、小圆细胞、管型、黏液等作为标记参数，输出标记信息，而且能够提供血尿的来源。为尿液检验的统一、标准化提供了条件，从而减少了显微镜检查时人员差异造成的结果误差。但是在临床工作中发现此仪器的检测结果存在一定的假阳性，需要引起检验人员及临床医生的注意，下面本研究就着重分析一下出现假阳性的原因。
１　对象和方法
１．１　标本来源
       采用抽签法随机收集中国人民解放军总医院住院患者尿液标本５００例。
１．２　仪器与试剂
       日本ＳＹＳＭＥＸ公司ＵＦ-１０００ｉ全自动尿沉渣分析仪、德国Ｒｏｃｈｅ公司ＵＲＩＳＹＳ２４００尿液干化学分析仪、日本奥林巴斯光学显微镜、中国北京仪和方圆科技有限公司ＩＥＣＣＬ４０离心机。试剂均为ＵＦ-１０００ｉ和ＵＲＩＳＹＳ２４００配套试剂，由北京巴瑞公司提供。
１．３　方法
       每天早晨做标本前对ＵＦ-１０００ｉ进行阴性、阳性质控物测试，确保质控通过后再进行标本的检测。所有送检标本均使用一次性清洁尿管收集晨尿１５～１８ｍＬ，并立即进行ＵＦ-１０００ｉ尿沉渣检测、干化学检测及显微镜镜检（离心后镜检），所有超过ＵＦ-１０００ｉ分析仪参考范围而镜检正常者视为假阳性结果（ＵＦ-１０００ｉ分析仪正常参考范围如下：红细胞：０～２７／μＬ；白细胞：０～３６／μＬ；管型：０～１／μＬ；上皮细胞：０～１５／μＬ；精子：０～１／μＬ）。
１．４　统计学方法
       所有数据均采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行处理，计数资料用例数和百分数表示，行敏感度，特异度和Ｋａｐｐａ系数统计学分析，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２　结果
２．１　阳性、假阳性结果统计分析
       以镜检为标准，分别统计ＵＦ-１０００ｉ检测红细胞、白细胞、管型、上皮细胞的假阳性率。５００份样本中，有１７８份阳性样本（ＲＢＣ８３例、ＷＢＣ６１例、管型１３例、ＥＣ２１例），其中有２０份样本ＵＦ-１０００ｉ的主要检测项目均出现假阳性，其中ＲＢＣ、ＷＢＣ、管型、ＥＣ分别有９例、５例、３例、３例出现了假阳性结果，假阳性率分别为１０．８％、８．２％、２３．１％、１４．３％，详见表１。

２．２　假阳性检测结果的干扰物分析
       尿液标本中携带污染、患者服用某些药物、留取标本的容器不清洁以及仪器本身的灵敏性等都会使得ＲＢＣ、ＷＢＣ、管型、ＥＣ等检测指标出现假阳性结果，假阳性检测结果的干扰物主要有结晶、细菌、真菌孢子、大量黏液丝、阴道毛滴虫等，详见表２。

２．３　ＵＦ-１０００ｉ的灵敏度，特异性分析
       以尿液镜检结果为金标准，对ＵＦ-１０００ｉ尿液沉渣流式自动分析仪的灵敏度，特异性、及Ｋａｐｐａ系数进行统计学分析，详见表３。灵敏度＝真阳性／（真阳性＋假阴性）＝１５８／（１５８＋５）＝９６．９３％；特异性＝真阴性／（真阴性＋假阳性）＝ ３１７／（３１７＋２０）＝９４．０７％；Ｋａｐｐａ系数为０．９３３（Ｐ＜０．０５）。

３　讨论
       由于尿沉渣分析仪并不对标本作任何处理，所以对尿中细胞造成破坏有限，基本上保持了细胞的完整的形态，从而提高了检测的准确性。但是，由于其基本原理是分析尿液有形成分的大小，且尿沉渣成分复杂，所以在尿沉渣检测中难于避免假阳性结果，其用途和结果仍然只是进行人群筛选。经过本研究总结，引起假阳性的原因可能有：
       １）标本污染问题：ＷＢＣ、ＲＢＣ增多，而干化学ＷＢＣ、ＲＢＣ阴性或弱阳性，此时用标准化的显微镜复检，发现标本可能是污染严重、容器不够洁净或有大量磷酸盐、尿酸盐结晶、特别是草酸钙结晶、细菌等有形物质增多所致。标本室温放置时间过长可能会有大量细菌繁殖，从而影响检测结果的准确性。因此，实验室工作人员应尽快进行尿液的相关检测，避免假阳性结果的出现，发现干化学与流式分析仪结果不一致时要及时镜检。
       ２）敏感度问题：尿沉渣分析仪对红细胞检测比人工镜检敏感，但敏感性高会将形态类似于红细胞的大量结晶（主要是圆形草酸钙结晶）、非晶形盐类、真菌孢子、细菌、脂肪滴等误判为红细胞。当尿中类酵母细胞增多且红细胞计数也增高时，本研究显示红细胞计数为假阳性增多，主要是由于类酵母细胞中椭圆形孢子增多，分析仪会将其误认为红细胞而导致假阳性。因此，仪器灵敏度提高的同时假阳性率也有所增加，所以当仪器提示类酵母细胞增多时，有必要进行标准化的显微镜复检加以区别。
       ３）尿液自身问题：当尿中上皮细胞增多时，干化学的ＷＢＣ、ＲＢＣ会出现假阳性率增高，而流式尿分析仪的ＷＢＣ、ＲＢＣ计数不高，２者结果不符时，临床实验室工作人员要及时用标准化的显微镜复检标本，排除假阳性结果。检查结果有管型标记，此时用标准化的显微镜复检为尿中黏液丝、白细胞团等增多所致，少数女性尿中为白带增多也可引起。偶见真菌大量出现引起管型假阳性。因此，临床实验室工作人员在出具检查报告时一定要注明未见管型，以免引起临床医生的误诊。
       根据前向散射光脉冲测定管型的长度，荧光脉冲测定管型内含物，电阻抗脉冲测定管型的外形。由于尿液中含有多种有形成分，形态各异，以至产生与管型相似的前向散射光脉冲和荧光脉冲宽度，被仪器误认为管型而产生假阳性结果。造成尿沉渣分析仪管型假阳性的原因可能有以下几种情况：① 大量的上皮细胞：当部分上皮细胞发生黏连成一体时，其分布宽度和散射宽度均增大，被仪器误认为病理管型，这种情况多见于女性的尿中。② 成团的脓细胞：成团的脓细胞在鞘液中易形成串珠排列，使前向散射光宽度和荧光脉冲宽度均增强，而被仪器误认为管型。③ 黏液丝：大部分黏液丝黏附细菌或细胞等而被荧光染色后，发出强的前向散射光脉冲，在大小和外形上接近病理管型而被仪器误认。④ 其他：如大量的磷酸钙结晶，其外形与管型相似而被误认为是管型，此外尿液中的真菌、细菌和其他杂质也可能造成尿液检查管型呈假阳性，应多加注意。
       随着检验技术的发展，尿液分析仪日新月异，不断更新换代，尿沉渣分析仪准确性、精密度、分析速度等都优于人工，特别是在诊断血尿来源方面。仪器的方便，准确，干扰小等特性，为临床检验提供了很好的诊断依据。但在临床工作过程中，ＵＦ-１０００ｉ型尿沉渣分析仪仍存在一些不足，对杂质含量较少的标本其分析结果均比较准确，可用于尿液标本的快速筛查检测，但对含杂质多，如结晶、非结晶型盐类多的标本，其出现假阳性的比率较高。因标本中杂质太多容易引起机器的误判，造成假阳性率增高，值得检验医师的关注，以避免因仪器检测造成的某些误诊或漏诊情况的发生。所以，ＵＦ-１０００ｉ仪器的检查只能是作为筛查，不能完全取代人工镜检。
                                                                                                                                        编辑：范伟伟