几种检测尿红细胞方法的价值与互补关系
解放军301医院临床检验科 丛玉隆 马骏龙
尿红细胞检测对肾脏及泌尿系统疾病诊治有重要意义,现用的有显微镜检查(镜检)、干化学分析、流式细胞仪及单克隆抗体免疫法等技术,如何正确选用,合理分析和评价试验结果,对疾病诊断至关重要。
一、 干化学尿红细胞检查
干化学尿红细胞检查可一滴尿液即刻检出尿中红细胞或游离血红蛋白(Hb),并弥补镜检不能发现破碎红细胞之不足。其优点是方法简便,快捷。此外,该方法还可作为红细胞镜检的筛选法。但将干化学尿红细胞检查作为筛选方法时,要注意方法的敏感性,使假阴性率控制在最低水平,以防止漏诊。一般可将干化学尿红细胞检查的假阳性率和假阴性率控制在适度范围内,然后,再用镜检对超过参考值的标本作进一步确诊。
影响干化学法测定结果的因素较多。除仪器和试剂带必须完全符合筛选标准要求外,工作人员熟练的操作和高度的责任心是十分重要的。美国临床检验标准委员会(NCCLS)提出了三条干化学筛选后镜检的标准:即医生提出要求;病人的病情或其他检查结果的需要;尿液的任何一项物理化学检查不正常;凡符合其一者均需镜检。我们在使用MIDITRON半自动尿液分析仪和URISYS2400全自动尿液分析仪及配套试剂带进行干化学筛选后,必须镜检的标准是:①医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等;②泌尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;③尿液颜色、浊度、蛋白、亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议,有学者认为镜检是尿沉渣分析的参考标准,其重要意义是任何方法无可替代的,只要有条件,最好每份标本都镜检。但鉴于镜检不能分析破碎细胞,还必须同时做干化学检查进行参照。在标本量很大,无自动化仪器帮助筛选的情况下,国内专家认为,干化学检查可以作为筛选手段。但必须遵守筛选标准,同时选择性地做镜检。
二、 尿红细胞镜检
尿液红细胞检查不仅对各种肾、泌尿系统疾病,如外伤、炎症、结石、结核、肿瘤等疾病的诊断有意义,而且对各种原发性或继发性急性和慢性肾小球肾炎或肾病的诊断和鉴别诊断也有一定的诊断价值。此外,尿红细胞形态对区分肾性与非肾性血尿的临床意义更大。从1979年Birch 和Fairley首先用相差显微镜观察尿红细胞形态变化来鉴别肾性与非肾性血尿以来,国内外有不少学者采用类似的方法作临床研究,发现肾性血尿中至少有2种以上红细胞形态的改变,即红细胞大小改变与形态异常和红细胞内Hb分布与含量变化。非肾性血尿中红细胞大小及形态一致,以单一正常形态红细胞为主。除红细胞本身病理因素改变外,不同pH和渗透压的变化,也可导致红细胞形态的改变。研究发现:①碱性(pH>9.0)尿中,红细胞膜脂质外层表面增加,出现锯齿形红细胞和棘形红细胞;②酸性(pH<4.0)尿中,红细胞膜脂质内层表面增加,出现可逆口型红细胞或细胞溶解、破坏;③渗透压较低(<400mmol/L)时,出现面包圈样、戒形红细胞且易溶血;④渗透压较高(>900mmol/L)且pH增加时,则形成锯齿形、棘形红细胞。
尿沉渣镜检法是尿红细胞检查的参考标准,可以进行红细胞数目的定量分析,有经验的技术人员还可同时观察红细胞形态变化。该方法既是当今肾及泌尿系统疾病重要的诊断依据,也是规范尿液分析的重要内容。迄今为止尚无一种自动化仪器能替代尿沉渣镜检。因此,原则上最好每份标本均应进行镜检。其不足是:①有些红细胞在肾脏长时间滞留,受机械作用破碎或在血管内发生溶血,形成Hb尿,不能检出;②规范化尿沉渣镜检操作较为繁琐(标准化操作步骤:新鲜尿液10ml,1500r/min离心5min后留0.2ml尿沉渣,将尿沉渣充盈到标准尿沉渣计数板内,计算出红细胞数/μl);③获得准确的试验结果,除需训练有素、工作认真负责的技术人员外,还需对所用试验器材(标本收集器皿、离心机及计数板)进行标准化。
<P> 现在,国外已推出许多商品化的装置,如MD-KOUA System(包括离心管、定量计数板)、DiaSys、Censlide等尿沉渣检测系统,特别是近年来,多媒体显微计算机图象系统的普及应用,不仅能将图象放大,更易辨别沉渣成分,而且还将标准化计数装置与带有显微摄像系统的显示器电脑工作站联系起来,使沉渣计数更方便、更准确。此外,自动尿沉渣分析仪器的研究也取得可喜进展,目前已有2种类型的仪器(IRIS和UF-100)问世。这2种仪器原理截然不同,前者实际是一台带图 |