血液促凝剂在采血试管中的应用及评价

扬雷

       伴随自动分析仪器的集约化或条型码的应用，真空采血管采取血液标本增加了检测量，多种生化、免疫检验项目组合系列化，更进一步提高了检验速度和精度，采血的规范化为检验质量管理提供了重要的手段，也为临床各科提供可信赖的化验报告。但是，有关公司在制造促凝剂采血管对促凝剂缺乏规范化的质量管理；有关医疗单位在使用促凝采血管时缺乏规范化使用，血液没有完全凝固好就离心，出现了纤维蛋白丝和块状物阻塞自动分析仪采血针、标本溶血等异常现象，严重地影响了检验结果可靠性。实践证明，必须提高基础理论水平才能制备出高品质的血清标本，现就此综述如下。

血液凝固原理及出现的异常现象
       血液凝固机制是一系列凝血因子相继被激活，最后形成纤维蛋白凝块的过程。如果凝血速度过快，则纤维蛋白收缩也加快，很易挤压脆弱的红细胞碎裂而引起轻度溶血。血块比重大于血清，所以血清在上血块在下，此时血清下端和血球上端仍有接触，细胞仍然可利用血清中养分使血糖测定值下降，乳酸脱氢酶、血清钾测定值上升。当使用血清分离胶促凝采血管时，由于分离胶比重大于血清而小于血块，所以，上层为血清、中层为分离胶、下层为血块，因而血清中各种成分保持着生理水平。
       血液自然凝固与温度相关，血液在玻璃试管中在３７℃水浴中３０ｍｉｎ就能凝固。但是需要指出的是：如果采血后血液和促凝剂没有充分混合时或者血液没有完全凝固就离心，很容易形成纤维蛋白胶冻样凝固或者纤维蛋白丝状物其比重比血块小，所以留在血清层，部分附着于分离胶周围，如果此时直接上机可造成自动分析采血针的堵塞。
       血液凝固所需要时间和血液促凝剂、不同容器的影响因素玻璃试管在血液凝固中因玻璃试管内壁面与第 Ⅻ、Ⅺ 凝血因子接触使其活化，在室温２３℃条件下，约３０ｍｉｎ血液大部分完成凝固。但是，疏水性的塑料试管内壁与第 Ⅻ、Ⅺ 凝血因子接触其活化能力非常弱，凝固需要５～６ｈ或者更长的时间。为此，向玻璃试管内壁和塑料试管内壁喷涂血液促凝剂，采血后经过不同的时间，离心后在血清中出现的纤维蛋白的容积率比较结果证明，未加促凝剂的塑料试管纤维蛋白块的容积率经过２ｈ为８０％没有收缩。但是，未加促凝剂的玻璃试管，纤维蛋白容积率经过２ｈ纤维蛋白收缩完全；加入促凝剂的塑料试管纤维蛋白容积率在３０ｍｉｎ内纤维蛋白完全收缩；加入促凝剂的玻璃试管在１０ｍｉｎ内完全收缩。实验证明，所用的硅石粉或玻璃粉末等非生理促凝剂涂布管壁不影响血清成分的测定值，矫正了塑料试管凝血时间长的缺点。

有关文献记载的促凝剂及使用方法
       日本许多公司的真空采血管促凝剂常用玻璃微粒、硅石微粉末、无活性硅石、硅石碳素微粉末及蛇毒等喷涂试管内壁。组织凝血活酶促凝剂是用兔脑、牛脑等用乙醚提取的粗制品以脑磷脂为主（氨基单磷脂）及其他物质的混合物，所以呈浅黄色粉剂，一般用于体外试验凝血因子的检验，如果用于真空采血管中的促凝剂，对检验项目测定值有一定的影响。高活性的促凝剂也是用兔脑、牛脑等经特殊加工制成、呈灰白色的促凝剂精制品，对检验项目测定值没有影响。血液促凝剂用４００目非活性硅石等多种非生理性促凝成分经特殊加工制成，用作真空采血管中添加剂，有喷涂法、粉剂耳勺法、促凝球及纸片法。实验证明，其对生化及免疫项目测定值没有影响，能激活血浆中和血小板中的部分凝血因子，促进凝血活酶和纤维蛋白凝块的生成过程，加速纤维蛋白凝块的退缩，达到快速分离血清的目的。促凝剂采血管和肝素抗凝采血管的区别在于，促凝管含血清分离胶促凝，主要用于批量标本系列生化、免疫项目检验，原管直接上自动化分析仪；肝素抗凝管含分离胶肝素抗凝剂，主要用于急诊生化、免疫项目检验、急诊干化学分析仪检测，采血后混合可立即离心获得血浆标本。为了保证检验结果正确性，２００４年日本临床检查标准协议会规范了采血法。

纤维蛋白析出与促凝剂
       含有促凝剂的真空采血管，有时会出现纤维蛋白析出的丝状物、块状物，是因为没有规范化使用促凝采血管所致。在制备真空采血管选择凝血速度过快的促凝剂会导致纤维蛋白收缩过快而脆弱的红细胞易碎裂引起轻度溶血。一般纤维蛋白的析出有下列原因：使用促凝采血管或者分离胶促凝采血管，要使促凝剂均匀地分布于血液中，必须轻微颠倒混合４～５次，使采血管的中央与周围的血液同时凝固。如果血液没有完全凝固好即离心，可造成纤维蛋白的析出。血清上部出现胶冻样、碎块样，与血液混杂在一起。纤维蛋白丝状物是纤维蛋白还没有收缩完全所致。其次，采血管公司在制备促凝剂采血管时，促凝剂喷涂不足或者配好的水溶性促凝剂当天没有用完，次日继续使用而导致促凝剂效力降低。血液中纤维蛋白原在促凝剂的作用下逐渐转变为不溶性纤维蛋白，如果促凝剂量不足或失效而延长了凝血时间，此时离心可导致纤维蛋白的析出。

如何防止真空采血管纤维蛋白的析出
       制备促凝剂真空采血管时要定量喷涂促凝剂，在小于４５℃条件下吹干；如果高于５０℃，促凝剂效力有下降的可能。用蒸馏水配制的促凝剂或用无水乙醇配制要有规范的质量管理，定量喷涂促凝剂。透析患者的血液要使用含有中和肝素促凝管分离血清，才能正确分离出高质量血清标本。

结 语
       血液促凝剂含血清分离胶促凝管是为了制备高品质血清标本，用于批量标本生化多项目检验，充分发挥全自动分析仪的多种功能。单纯要求血液快速凝固，其纤维蛋白和溶血出现几率高，要防止纤维蛋白的析出首先要规范使用促凝采血管。急诊检验项目多用于肝素抗凝采血管、含肝素分离胶采血管，可快速获得血浆标本。鉴于促凝采血管中纤维蛋白、轻度溶血的出现，在操作过程中是可以避免的，所以对生产、医务专业人员业务知识的培训及建立分析前的质量管理尤为重要。
                                                                                                    编辑：范伟伟